Reaccion Nucleofilica

Ciencia UANL
Universidad Autónoma de Nuevo León
rciencia@mail.uanl.mx
ISSN (Versión impresa): 1405-9177
MÉXICO

2004
Iram Pablo Rodríguez Sánchez / Hugo A. Barrera Saldaña
LA REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA A DOS DÉCADAS DE SU
INVENCIÓN
Ciencia UANL, julio-septiembre, año/vol. VII, número 003
Universidad Autónoma de Nuevo León
Monterrey, México
pp. 323-335

LA REACCIÓN ENCADENA
DE LA POLIMERASA A DOS DÉCADAS
DE SU INVENCIÓN
IRAM PABLO RODRÍGUEZ SÁNCHEZ*, HUGO A. BARRERA SALDAÑA*

P

ocos descubrimientos del complejo
mundo científico actual pueden ser
considerados realmente revolucionarios. Sin embargo, cuando ocurren
se transforma el modo en que se piensa y trabaja en
el laboratorio.
Aunque el progreso en las diferentes ramas de la
ciencia parece serlento y su evolución resulta una
letanía de «paso a paso», en el caso de la biología
molecular ha sucedido lo contrario. Esta disciplina
ha sido afortunada con grandes cambios en tiempos relativamente cortos.
Una época nutrida de dichos cambios fue la década de 1970, en la que se produjo un gran número de descubrimientos, como el de las enzimas de
restricción, la clonación de genes en plásmidos yfagos, y las técnicas de hibridación en filtro para
ADN y ARN, conocidas como “Southern” y “Northern
blot”, respectivamente; así como las invenciones de
las técnicas de secuenciación química y enzimática
para el ADN.1
Otro salto tecnológico ocurrió en 1983, cuando
Kary Mullis (figura 1) desarrolló una nueva técnica
que hizo posible la síntesis de grandes cantidades
de un fragmento de ADNsin tener que clonarlo: la
reacción en cadena de la polimerasa (conocida
como PCR por sus siglas en inglés). Esta técnica es
considerada la más revolucionaria del último cuarto del siglo XX.2 Con ésta se consigue copiar millones de veces, en un par de horas, una secuencia
predeterminada, dentro de una mezcla de ADN tan
compleja como el propio genoma humano, donde
la secuencia de interésrepresenta tan sólo una diezmillonésima parte.3
CIENCIA UANL / VOL. VII, No. 3, JULIO-SEPTIEMBRE 2004

Pero la PCR no es
sólo una técnica exquisitamente específica,
sino también muy sensible, pues en principio
para practicarla bastaría una sola molécula,
por ejemplo, del genoma humano (~6 picogramos), aunque habi- Fig. 1. Kary B. Mullis. Este sintualmente se emplean gular empleado de lacompañía Cetus Corporation, en
cantidades excesivas Emeryville, California, se hizo
de éste (en el orden de acreedor del Premio Nobel en
hasta microgramos).
1993 por la invención de la
Además, por si es- PCR, técnica utilizada para
tos atributos fueran multiplicar millonariamente in
pocos, la técnica es tan vitro fragmentos específicos de
robusta que puede usar cualquier ADN. Fuente: Archivos dela ULIEG.
como substrato para la
reacción al ADN, sin
tener que purificarlo de su fuente natural, y es común emplear productos biológicos diversos como
tejidos embebidos en parafina, semen recuperado
de escenas de violación, lavados bronquiales,
exudados de mucosas, raíces de cabellos o cejas,
sangre, extendidos citológicos, etc.; muchas veces
basta una simple ebullición de la muestra paralisar,
liberar y de paso desnaturalizar el ADN, dejándolo
listo para la reacción.

*Unidad de Laboratorios de Ingeniería y Expresión Genéticas, Departamento de Bioquímica, Facultad de Medicina de la Universidad Autónoma de Nuevo León.

323

LA

REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA A DOS DÉCADAS DE SU INVENCIÓN

¿Qué es la reacción en cadena
de la polimerasa?
La PCR es un método invitro de síntesis de ADN con
el que un segmento particular de éste es específicamente amplificado al ser delimitado por un par de
cebadores o iniciadores que lo flanquean. Su copiado se logra en forma exponencial a través de
repetidos ciclos de diferentes periodos y temperaturas de incubación en presencia de una enzima ADN
polimerasa termoestable. Así se obtienen en cuestión de horas...