Recuento De Leucoditos

PRACTICA NO 11
RECUENTO DE LEUCOCITOS

FUNDAMENTO

Se hace una dilución 1:20 utilizando un solvente hipotónico que sea capaz de destruir a los eritrocitos para evitar que interfieran en el recuento, generalmente se adiciona un colorante para resaltar a los leucocitos y facilitar su recuento, el cual se hace en la cámara de Neubauer, cuya capacidad conocemos, el recuento se realiza comonumero de leucocitos por mm3 de sangre. Para realizar la dilución, se usa una pipeta de thoma para leucocitos que es parecida a la de glóbulos rojos, pero con un bulbo menor y, por lo tanto. Una capacidad diferente. Se distingue por tener en el bulbo un pequeño artefacto de color blanco, en tanto que la de eritrocitos la tiene rojo. Sirve adicionalmente, para homogeneizar la mezcla cuando se pone enel agitador (veanse figs, 11 y 12)

OBJETIVOS

Al terminar la práctica, el alumno será capaz de:
1.- ejecutar correctamente el recuento de leucocitos.
2.- identificar la utilidad clínica del recuento de leucocitos
3.- describir el fundamento del método.

EQUIPO

Microscopio
Agitador eléctrico de pipetas de thoma
Contador de células

MATERIAL

a) biológico
Sangre obtenidacon EDTA




b) de laboratorio
Pipetas de thoma para leucocitos con boquilla
Cámara de Neubauer
Solución diluyente de turck (reactivo No. 18)
Gradilla
Tubos de ensayo de 13 x 100mm
Pipetas serologicas de 5 ml




PROCEDIMIENTO


1. Mezclar la sangre por lo menos durante 5 minutos.
2. Con la pipeta de thoma para leucocitos, aspirarsangre hasta la marca 0.5
3. Con la misma pipeta, y cuidando que no se salga la sangre aspirar liquido de turck hasta la marca 11. es recomendable rotar la pipeta al aspirar y hacerlo manteniéndola en posición vertical para evitar la formación de burbujas, que afectarían que la dilución que, en este caso, es de 1:20
4. Eliminar el exceso de diluyente secando la punta con papel absorbente5. Agitar la pipeta, durante 60 segundos, en el agitador eléctrico para conseguir una suspensión uniforme
6. Desechar las 3 o 4 primeras gotas de la pipeta, limpiar la punta con papel absorbente y llenar la cámara de Neubauer
7. Dejar reposar durante 2 min. Para permitir la sedimentación de leucocitos
8. Contar los leucocitos encontrados en los 4 cuadros grandes angulares, quecontienen cada uno 16 cuadros medianos (vease figura 12). Verificar que la distribución de las células sea homogénea de lo contrario, repetir el procedimiento
9. Multiplicar el número de leucocitos contados por 50 para obtener el total de glóbulos blancos por mm3 de sangre.


La formula utilizada para realizar los cálculos es la siguiente:


N x 20 X 10 = N X 50
4Donde


N= Numero de leucocitos contados
20= titulo de dilución
10= Corrección de la profundidad de a cámara para ajustar el volumen a 1mm 3
4= al total de cuadros grandes contados


VALORES DE REFERENCIA


En la tabla 11 se muestran los valores de referencia de acuerdo con la edad.

















Tabla 11
Leucocitos. Valores de referencia|Edad |Sexo |Valores |
| | |(leuc./mm3) |
|Recién nacidos |f/m |9 000 a 30 000 |
|1a 2 años |f/m |6 000 a 18 000 |
|3 a 10 años |f/m |4 000 a 13 500 |
|11 a 60 años |f/m |5 000 a 11 000 |...