Ruptura Celular

MÉTO
MÉTODOS
O
ODOS
DE
RUPTURA
TURA
T

MÉTODOS D RUPTURA
MÉTODOS DE RUPTURA
1. Métodos químicos de lisis celular:
Métodos químicos de lisis celular:
s
 Álcalis
 Lisozima y EDTA
Detergentes
 Disolventes orgánicos
 Choque osmótico
Choque osmótico
 Choque por enfriamiento
2. Métodos físicos de lisis ce
2. Métodos físicos de lisis ce
elular:
 Sonicación
 Cizallalíquida
 Cizalla sólida
sólida
 Congelación y descongelación

1. MÉTODOS QUÍMICOS DE LISIS CELULAR:
 ALCALIS:






La mayoría de las células se desintegran a un pH
entre 11.5 y12.5.
El método más sencillo, barato y fácil de aplicar a
gran escala. (sólo para aislar al asparaginasa).

INCONVENIENTE:
 La enzima deseado debe ser estable a pH
enzima deseado debe serestable pH
elevado durante 20-30 min.



LISOZIMA EDTA
LISOZIMA Y EDTA:
LISOZIMA
•Clara de huevo.
de huevo
•Destruye pared bacteriana
EDTA
•Lisar menbranas
•(Efecto quelante de iones Ca)



Rompemos las
células
células

Método delicado y específico .
Sólo a pequeña escala. (Alto precio).
pequeña escala (Alt precio)
Lisozima sólo eficaz par bacterias gram positivas.

DETERGENTES:




La mayor parte de las células pueden ser rotas por un
detergente a un pH, fuerza iónica y temperatura.
Tipos:





Iónicos.
No iónicos

INCONVENIENTES:
Desnaturalización de las proteínas.
 Complicado diseño y control de los procesos.(Efectos
medioambientales).
 Uso poco frecuente (para extracción de enzimas ligadas a
poco frecuente (parextracción de enzimas ligadas
ra
r
membranas)



DISOLVENTES ORGÁNICOS:


Método tradicional de ataque ( tolueno).
No se usan a gran escala.



INCONVENIENTES:



Precio
 Toxicidad Desnaturalización de proteínas
 Inflamabilidad




CHOQUE OSMÓTICO:



Suspender las células en agua destilada para liberar
las proteínas deseadas.
No a gran escala.

...