sant
Páginas: 11 (2610 palabras)
Publicado: 19 de noviembre de 2013
UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA SEDE MEDELLÍN
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE QUIMICA
LABORATORIO DE BIOQUIMICA
PRACTICA No3. ACTIVIDAD CATALITICA DE LA AMILASA SALIVAL
OBJETIVOS.
1. Experimentar sobre diferentes aspectos de la actividad enzimática.
2. Comprender la forma como diversos factores influyen sobre la actividad catalítica de las enzimas.
3. Evaluar la dependencia quepuede presentar una reacción enzimática con respecto a la acidez del medio, a la temperatura y a la concentración de la enzima.
FUNDAMENTO TEORICO
GENERALIDADES DEL ALMIDON.
El almidón es la principal fuente de reserva de carbohidratos de las plantas superiores, hallándose en los granos de cereales, semillas de leguminosas y en las frutas. Es el principal constituyente de rizomas ytubérculos.
En relación con la dieta humana, el almidón funciona como fuente de energía y sus propiedades físicas ayudan a mejorar la textura y la aceptabilidad de los alimentos. Estructuralmente, el almidón es un polímero de glucosas (glicano), unidas por enlaces -glicosídicos, y formado por dos compuestos diferentes: la amilosa (10 – 20 %) y la amilopectina (80 – 90 %).
La amilosa es un polímerolineal que puede contener hasta mil unidades de glucosa, ligadas entre sí por enlaces -1,4, sin ramificaciones. Es la fracción del almidón que con el yodo (2) forma un complejo de coloración azul intensa; el análisis con rayos X indica que su cadena se encuentra enrollada en forma de espiral, en cuyo interior se acomodan los átomos de yodo. La amilopectina es un polímero ramificado que puedecontener hasta 1 millón de unidades de glucosa, agrupadas en centenares de cadenas cortas lineales de 20 – 25 glucosas, ligadas entre sí por enlaces -1,4; un extremo de cada una de estas cadenas se une a otra mediante un enlace -1,6, originando así la múltiple ramificación del polímero:
DIGESTION DEL ALMIDON.
Junto a la sacarosa y la lactosa, el almidón completa la tríada decarbohidratos que normalmente hacen parte de la dieta humana. Para ser absorbido a través de la pared intestinal, el almidón debe ser digerido e hidrolizado hasta las unidades de glucosa, lo cual es realizado gradualmente por las enzimas digestivas que se hallan en la boca (amilasa salival), en el estómago (amilasa más HCl), y en el intestino delgado (amilasas pancreáticas ( y ), y el complejomaltasa-glicamilasa). La amilasa salival solo ataca las uniones -1,4 y genera básicamente maltosa y maltotriosa. Las amilasas pancreáticas hacen el mismo trabajo pero sobre los almidones que llegan intactos al intestino. El complejo maltasa-glicamilasa ataca tanto las uniones -1,4 como las -1,6 y convierte la maltosa, la isomaltosa y la maltotriosa en glucosa.
ENZIMA AMILASA SALIVAL.
La amilasasalival es la enzima digestiva presente en la boca, secretada por la glándula parótida. Se conoce como pTialina o -amilasa; tiene una masa molar de 50.000 y al ion calcio como factor. La -amilasa es una endoenzima que cataliza el rompimiento hidrolítico de los enlaces -1,4 glicosídicos de la región central de las cadenas de amilosa y amilopectina, generando maltosa, maltotriosa y en menor grado,glucosa. Como no actúa sobre los enlaces ramificantes -1,6, la -amilasa hidroliza en mayor grado la amilosa que la amilopectina.
La -amilasa tampoco tiene acción sobre las uniones -1,4 de la celulosa, cuya hidrólisis la realizan glucanasas especificas como la -1,4-glucanglucanohidrolasa y la -1,4-glucancelobiohidrolasa, llamadas comúnmente celulasas, que no están presentes en el aparatodigestivo de los humanos. La degradación de la amilosa por la -amilasa se puede representar así:
Otra enzima que ayuda a la degradación del almidón es la -amilasa, que no se encuentra en la saliva, pero si en el intestino. Se define como una exoenzima que hidroliza el penúltimo enlace glicosídico del extremo no reductor de una cadena de -glucano; actúa...
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE QUIMICA
LABORATORIO DE BIOQUIMICA
PRACTICA No3. ACTIVIDAD CATALITICA DE LA AMILASA SALIVAL
OBJETIVOS.
1. Experimentar sobre diferentes aspectos de la actividad enzimática.
2. Comprender la forma como diversos factores influyen sobre la actividad catalítica de las enzimas.
3. Evaluar la dependencia quepuede presentar una reacción enzimática con respecto a la acidez del medio, a la temperatura y a la concentración de la enzima.
FUNDAMENTO TEORICO
GENERALIDADES DEL ALMIDON.
El almidón es la principal fuente de reserva de carbohidratos de las plantas superiores, hallándose en los granos de cereales, semillas de leguminosas y en las frutas. Es el principal constituyente de rizomas ytubérculos.
En relación con la dieta humana, el almidón funciona como fuente de energía y sus propiedades físicas ayudan a mejorar la textura y la aceptabilidad de los alimentos. Estructuralmente, el almidón es un polímero de glucosas (glicano), unidas por enlaces -glicosídicos, y formado por dos compuestos diferentes: la amilosa (10 – 20 %) y la amilopectina (80 – 90 %).
La amilosa es un polímerolineal que puede contener hasta mil unidades de glucosa, ligadas entre sí por enlaces -1,4, sin ramificaciones. Es la fracción del almidón que con el yodo (2) forma un complejo de coloración azul intensa; el análisis con rayos X indica que su cadena se encuentra enrollada en forma de espiral, en cuyo interior se acomodan los átomos de yodo. La amilopectina es un polímero ramificado que puedecontener hasta 1 millón de unidades de glucosa, agrupadas en centenares de cadenas cortas lineales de 20 – 25 glucosas, ligadas entre sí por enlaces -1,4; un extremo de cada una de estas cadenas se une a otra mediante un enlace -1,6, originando así la múltiple ramificación del polímero:
DIGESTION DEL ALMIDON.
Junto a la sacarosa y la lactosa, el almidón completa la tríada decarbohidratos que normalmente hacen parte de la dieta humana. Para ser absorbido a través de la pared intestinal, el almidón debe ser digerido e hidrolizado hasta las unidades de glucosa, lo cual es realizado gradualmente por las enzimas digestivas que se hallan en la boca (amilasa salival), en el estómago (amilasa más HCl), y en el intestino delgado (amilasas pancreáticas ( y ), y el complejomaltasa-glicamilasa). La amilasa salival solo ataca las uniones -1,4 y genera básicamente maltosa y maltotriosa. Las amilasas pancreáticas hacen el mismo trabajo pero sobre los almidones que llegan intactos al intestino. El complejo maltasa-glicamilasa ataca tanto las uniones -1,4 como las -1,6 y convierte la maltosa, la isomaltosa y la maltotriosa en glucosa.
ENZIMA AMILASA SALIVAL.
La amilasasalival es la enzima digestiva presente en la boca, secretada por la glándula parótida. Se conoce como pTialina o -amilasa; tiene una masa molar de 50.000 y al ion calcio como factor. La -amilasa es una endoenzima que cataliza el rompimiento hidrolítico de los enlaces -1,4 glicosídicos de la región central de las cadenas de amilosa y amilopectina, generando maltosa, maltotriosa y en menor grado,glucosa. Como no actúa sobre los enlaces ramificantes -1,6, la -amilasa hidroliza en mayor grado la amilosa que la amilopectina.
La -amilasa tampoco tiene acción sobre las uniones -1,4 de la celulosa, cuya hidrólisis la realizan glucanasas especificas como la -1,4-glucanglucanohidrolasa y la -1,4-glucancelobiohidrolasa, llamadas comúnmente celulasas, que no están presentes en el aparatodigestivo de los humanos. La degradación de la amilosa por la -amilasa se puede representar así:
Otra enzima que ayuda a la degradación del almidón es la -amilasa, que no se encuentra en la saliva, pero si en el intestino. Se define como una exoenzima que hidroliza el penúltimo enlace glicosídico del extremo no reductor de una cadena de -glucano; actúa...
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