Secuenciación de genes
Microarreglos
Los microarreglos Son soportes sólidos en los que se encuentran inmovilizados en un área pequeña, de cientos a miles de genes de manera ordenada
Estapequeña superficie puede ser de:
• Laminas de vidrio
• Laminas de silicón
• Membranas de Nylon
En los microarreglos, el DNA puede ser impreso, depositado o sintetizado directamente sobre lasuperficie sólida. Esta colección representa una parte o todos los genes de un organismo
Cada alícuota que se tenga en la superficie representa a un gen.
El material fijado a la superficiepuede ser:
• DNA normal
• DNA complementario
• Oligonucleótidos.
Los microarreglos se basan en el principio bien conocido de que las moléculas de ácidos nucleicos se aparean e hibridizan consus bases complementarias y al hecho de que los genes activos copian su información en forma de RNA mensajero.
Se construyen sistemas pasivos de DNA inmovilizado, estos sistemas representan unaamplia parte del genoma normal y pueden ser hibridizados por secuencias de RNAm proveniente de celulas o tejidos cuyos genes seran explorados.
Se necesitan en promedio 1 a 2 microgramos de ARNm o10 microgramos de ARN para el diseño del microarreglo.
Los blancos están marcados con material fluorescente (Cy3, Cy5 o biotina) que luego puede ser detectado mediante fotoimagen o escáner defluorescencia.
La marcación fluorescente de los residuos se hace evidente mediante láser, cámara y microscopio que crean una imagen digital del arreglo.
Estos datos se llevan al computador y unprograma analiza la emisión de colores. Cada punto en el arreglo se asocia con un gen en particular, y dependiendo del tipo de arreglo, los colores obtenidos aportarán información sobre la expresióngénica.
Tipos de Microarreglos
Existen 3 clases de sondas que pueden ser utilizadas para el diseño de microarreglos:
• Dos son genómicas (unas pueden detectar pérdida o ganancias de genes...
Regístrate para leer el documento completo.