Seminario doctoral
Páginas: 14 (3381 palabras)
Publicado: 2 de enero de 2014
UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS
(Universidad del Perú, DECANA DE AMERICA)
FACULTAD DE MEDICINA
E.A.P. TECNOLOGÍA MÉDICA
LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA
CITODIAGNÓSTICO
TEMA: INMUNOCITOQUIMICA
ALUMNOS:
CANO ALVAREZ LUIS
CERON BAEZ OSMAN
COLLANQUI TORRES ROSVERI
CONISLLA LIMAYA DAYANNE
CORDOVA FREDY
INTRODUCCIÓN
Es un conjuntode técnicas diseñadas para la localización de moléculas en los tejidos mediante el empleo de anticuerpos. Se basa en la gran especificidad y alta afinidad que tienen los anticuerpos para reconocer a moléculas y unirse a ellas. Además, la combinación de los anticuerpos con enzimas o con sustancias fluorescentes permite detectar cantidades ínfimas de moléculas presentes en la célula.
Losanticuerpos o inmunoglobulinas que se usan en las técnicas inmunocitoquímicas son del tipo G, producidas por unas células del sistema inmunitario denominados linfocitos B.
Cuando estas técnicas se emplean sobre cortes de tejido o cultivo de células se usan los términos de tinciones inmunocitoquímicas o inmunohistoquímicas, con la diferencia de que la primera se encarga de demostrar antígenoscelulares y la otra técnica se utiliza para demostrar antígenos tisulares
.
La herramienta fundamental de la inmunocitoquímica es el anticuerpo, que como ya se había dicho antes son moléculas proteicas, formadas por dos cadenas ligeras y dos pesadas. Su estructura está constituida por dos zonas de polaridad diferentes, una de estas porciones contiene dos regiones con idéntica afinidad para su unión conel antígeno, esta es la región más crucial del sistema ya que esta segunda parte debe tener la propiedad de reconocer específicamente el sustrato que interesa. De esta forma se evitan las reacciones cruzadas y falsas positivas.
I. ANTECEDENTES
La inmunocitoquímica tiene su origen a mediados de 1941, gracias al equipo de Albert H. Coons que consiguió marcar un anticuerpocon una sustancia fluorescente para detectar la presencia de un antígeno en un tejido.
En este trabajo veremos los diferentes tipos y aplicaciones que desarrolla esta técnica que ayuda a complementar el estudio citológico.
1966, Nakane y colaboradores; tecnica de marcar anticuerpos con peroxidasa de rabano
Los refinamientos tanto conceptuales como técnicos sucedidos en las últimas dos décadashan permitido el desarrollo de métodos más sensibles, tales como el uso de enzimas conjugadas a anticuerpos y procedimientos enzimáticos sin anticuerpos conjugados.
La enzima peroxidasa. Glicoproteína extraída de las raíces del rábano, con peso molecular de 40.000 daltones y compuesta por mQs de 20 iso-enzimas con rango de actividad enzimática entre los pH 5.5 a 7.6, ha demostrado ser unexcelente marcador inmunocitoquímico, cuando se la conjuga con inmunoglobulinas del tipo G (IgG].
En 1968, Nakane, describió el uso de la enzima peroxidasa conjugada a anticuerpos IgG, como marcador inmunocitoquímico aplicado a la demostración de hormonas adenohipofisiarias. La inmuno reacción es fácilmente reconocida a nivel tisular mediante el empleo de un substrato cromógeno donador de electrones,la 3,3' diaminobenzidina.
1969, Masson; inmunoglobulina-enzima
Mason y colaboradores, desarrollaron un método que no requiere de la conjugación directa de la enzima peroxidasa a moléculas de IgG, sino que depende de una reacción de enlace de los anticuerpos con moléculas libres de la enzima. La reacción se verifica en cuatro etapas sucesivas. En la primera los anticuerpos específicosreaccionan con determinantes antigénicos en el tejido. En la segunda etapa se utilizan anticuerpos (IgG) contra la especie animal en la cual fue preparado el primer antisuero. En una tercera etapa se adicionan anticuerpos anti-peroxidasa. Finalmente. En la cuarta etapa se adicionan moléculas libres de la enzima peroxidasa las cuales son captadas por los anticuerpos de la tercera etapa. Este método...
(Universidad del Perú, DECANA DE AMERICA)
FACULTAD DE MEDICINA
E.A.P. TECNOLOGÍA MÉDICA
LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA
CITODIAGNÓSTICO
TEMA: INMUNOCITOQUIMICA
ALUMNOS:
CANO ALVAREZ LUIS
CERON BAEZ OSMAN
COLLANQUI TORRES ROSVERI
CONISLLA LIMAYA DAYANNE
CORDOVA FREDY
INTRODUCCIÓN
Es un conjuntode técnicas diseñadas para la localización de moléculas en los tejidos mediante el empleo de anticuerpos. Se basa en la gran especificidad y alta afinidad que tienen los anticuerpos para reconocer a moléculas y unirse a ellas. Además, la combinación de los anticuerpos con enzimas o con sustancias fluorescentes permite detectar cantidades ínfimas de moléculas presentes en la célula.
Losanticuerpos o inmunoglobulinas que se usan en las técnicas inmunocitoquímicas son del tipo G, producidas por unas células del sistema inmunitario denominados linfocitos B.
Cuando estas técnicas se emplean sobre cortes de tejido o cultivo de células se usan los términos de tinciones inmunocitoquímicas o inmunohistoquímicas, con la diferencia de que la primera se encarga de demostrar antígenoscelulares y la otra técnica se utiliza para demostrar antígenos tisulares
.
La herramienta fundamental de la inmunocitoquímica es el anticuerpo, que como ya se había dicho antes son moléculas proteicas, formadas por dos cadenas ligeras y dos pesadas. Su estructura está constituida por dos zonas de polaridad diferentes, una de estas porciones contiene dos regiones con idéntica afinidad para su unión conel antígeno, esta es la región más crucial del sistema ya que esta segunda parte debe tener la propiedad de reconocer específicamente el sustrato que interesa. De esta forma se evitan las reacciones cruzadas y falsas positivas.
I. ANTECEDENTES
La inmunocitoquímica tiene su origen a mediados de 1941, gracias al equipo de Albert H. Coons que consiguió marcar un anticuerpocon una sustancia fluorescente para detectar la presencia de un antígeno en un tejido.
En este trabajo veremos los diferentes tipos y aplicaciones que desarrolla esta técnica que ayuda a complementar el estudio citológico.
1966, Nakane y colaboradores; tecnica de marcar anticuerpos con peroxidasa de rabano
Los refinamientos tanto conceptuales como técnicos sucedidos en las últimas dos décadashan permitido el desarrollo de métodos más sensibles, tales como el uso de enzimas conjugadas a anticuerpos y procedimientos enzimáticos sin anticuerpos conjugados.
La enzima peroxidasa. Glicoproteína extraída de las raíces del rábano, con peso molecular de 40.000 daltones y compuesta por mQs de 20 iso-enzimas con rango de actividad enzimática entre los pH 5.5 a 7.6, ha demostrado ser unexcelente marcador inmunocitoquímico, cuando se la conjuga con inmunoglobulinas del tipo G (IgG].
En 1968, Nakane, describió el uso de la enzima peroxidasa conjugada a anticuerpos IgG, como marcador inmunocitoquímico aplicado a la demostración de hormonas adenohipofisiarias. La inmuno reacción es fácilmente reconocida a nivel tisular mediante el empleo de un substrato cromógeno donador de electrones,la 3,3' diaminobenzidina.
1969, Masson; inmunoglobulina-enzima
Mason y colaboradores, desarrollaron un método que no requiere de la conjugación directa de la enzima peroxidasa a moléculas de IgG, sino que depende de una reacción de enlace de los anticuerpos con moléculas libres de la enzima. La reacción se verifica en cuatro etapas sucesivas. En la primera los anticuerpos específicosreaccionan con determinantes antigénicos en el tejido. En la segunda etapa se utilizan anticuerpos (IgG) contra la especie animal en la cual fue preparado el primer antisuero. En una tercera etapa se adicionan anticuerpos anti-peroxidasa. Finalmente. En la cuarta etapa se adicionan moléculas libres de la enzima peroxidasa las cuales son captadas por los anticuerpos de la tercera etapa. Este método...
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