Separacion Y Cuantificacion De Vitaminas

Método de separación de Vitaminas
Cromatografía en capa fina (CCF)
Se emplea una placa de vidrio o una lamina metálica, que se cubre con una película de unos 250microm de espesor de un adsorbente(gel de sílice u oxido de aluminio).
A continuación se sitúa en el extremo inferior la disolución de las sustancias que se van a separar. Esta separación se lleva a cabo en una cubeta, que contieneun agente eluyente hasta una altura de 0.5 cm; las sustancias que se separan se detectan posteriormente de forma apropiada.
Por variación y preparación adecuada de la capa de adsorción se consigue elanálisis de mezclas de sustancias tanto hidrófilas como lipófilas.
La mayor ventaja de este método es, junto a su gran capacidad de separación, la rapidez del proceso que en general, requieresolamente 10-30 minutos.
*En la cromatografía de capa fina, un adsorbente está depositado formando una delgada capa sobre una placa de vidrio, papel de aluminio u otros materiales, por la que ascienden,arrastradas por un disolvente (eluyente), una o más sustancias que se pretenden separar o identificar.
Con la ayuda de un capilar de vidrio, una pequeña cantidad de muestra se deposita sobre eladsorbente, muy cerca del extremo inferior de la placa. Una vez depositada la muestra, se introduce la placa en una cubeta de cromatografía, que contiene en el interior el disolvente con el que va adesarrollarse el cromatograma. La altura del disolvente en dicho frasco o cubeta debe ser tal, que éste no toque la zona donde se encuentra la pequeña mancha de producto depositado. La placa se coloca enposición vertical, ligeramente inclinada.
El disolvente asciende entonces por capilaridad a lo largo de la placa, arrastrando a los compuestos a diferentes velocidades, según el grado de adsorción deéstos produciéndose asi su separación. Transcurridos unos minutos, cuando el frente del disolvente se encuentra próximo al extremo de la placa, se saca ésta de la cubeta, se deja secar y se examina....