Tecnicas De Microscopia

FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA SOBRE TECNICAS MICROSCÓPICAS

Microscopia de luz o de campo claro

1. Microscopio de campo claro
1.1. Introducción

    El microscopio es un instrumento básico para el estudio de la Biología, ya que nos permite percibir detalles de organismos y estructuras que no podrían ser observados directamente, por simple inspección ocular (5).
    Para observar elementostan pequeños es necesario disponer de lentes de aumento. Estas lentes se conocen desde tiempos de Arquímedes, pero la óptica como disciplina se comenzó a desarrollar en el siglo XIII con el monje franciscano Roger Bacon (6).
La utilidad de cualquier tipo de microscopio, no sólo depende de su capacidad de aumento sino, más importante, de su capacidad para resolver detalles (1).
P ara el estudiodel material biológico se dispone de varios tipos de microscopios, lo cuales se pueden clasificar básicamente de acuerdo al tipo de fuente luminosa que usan, siendo el microscopio óptico de campo claro,  el de uso más generalizado (4).
Este es un microscopio compuesto que utiliza dos sistemas de lentes; el primero produce una imagen amplificada del objeto, y el segundo agranda la imagen formadapor el primero (5).
De acuerdo con la radiación que utilizan, se clasifican en:
• Ópticos o luminosos:
     - Campo claro
     - Campo oscuro
     - Contraste de fases
     - Fluorescencia
     - Ultravioleta
• Electrónicos
    - Barrido
    - Transmisión
1.2. Microscopio de campo claro
   Para formar una imagen a partir de un corte histológico usa luz visible, por esto lamuestra debe ser lo bastante fina como para que los haces de luz puedan atravesarla. También se usan métodos de tinción, según las necesidades, con el fin de aumentar los detalles en la imagen (3).
    El campo del microscopio está intensamente iluminado, mientras que los objetos observados aparecen más oscuros. En general con este microscopio se pueden alcanzar los 1000 aumentos, pudiéndosellegar con ciertas modificaciones a 2000 y 3000 aumentos (5).
    El ojo humano no logra distinguir objetos de menos de 50 micras de diámetro ni consigue resolver dos líneas separadas por menos de 100 micras (es decir, las ve como una sola línea) Fig.1 (6).

Figura 1. Mecanismo óptico del microscopio de campo blanco. El lente que se encuentra más cercano al espécimen se denomina objetivo, tieneuna distancia focal corta y, forma una imagen real y aumentada que es el objeto del segundo sistema de lentes denominado ocular. El condensador tiene la función de condensar la luz sobre el espécimen (6).
1.3. Curso de la luz en el microscopio
El condensador proyecta un cono de luz sobre las células que están siendo examinadas en el microscopio. Después de atravesar a las células, ese hazluminoso, en forma de cono, penetra en el objetivo; el objetivo proyecta una imagen aumentada en el plano focal del ocular, que nuevamente la amplia. Por fin la imagen provista por el ocular puede ser percibida por la retina del ojo como una imagen situada a 25 cm de la lente ocular. La ampliación total dada por un microscopio es igual al aumento del objetivo multiplicado por el aumento del ocular (1).1.4. Sistema mecánico
    Este sistema sostiene al sistema óptico y aloja los elementos necesarios para la iluminación y enfoque del preparado. (6).
  
- Pie: brinda apoyo y estabilidad al aparato (6).
  - Vástago: soporta la platina, tubo y tornillos de ajuste macro y micrométrico (6).
- Tornillo de Ajuste: provocan el desplazamiento del tubo o la platina en sentido vertical, lo quepermite el enfoque (6).
   
Pie y Tornillo de ajuste
- Tubo: en su extremo superior se halla el ocular, y en el inferior el objetivo. Se trata de un cilindro metálico cuyo interior se encuentra pintado de negro, lo que evita la reflexión de la luz. Normalmente tiene una longitud de 170 mm (6).
-  Platina: es una plataforma horizontal sobre la cual se coloca y sujeta el preparado a...