tecnicas histologicas

PROGRAMA:
I. INTRODUCCION
II. RESUMEN TECNICAS HISTOLOGICAS 2
III. TINCION, COLORANTES ACIDOS Y BASICOS
IV. PREPARACION DE HEMATOXILINA Y EOSINA DE HARRIS Y ESPECIAL, PREPARACION DE AGUA AMONIACAL Y ACIDA, PARA QUE SIRVE Y COMO SE HACE.
V. MONTAJE ( QUE ES, PARA QUE SIRVE, AGENTES NATURALES Y SINTETICOS Y SU APLICACIÓN
VI. TIPOS DE MONTAJE PERMANENTES, PROVISIONALES, SU CONSERVACIONDE LAMINILLAS
VII. HISTOQUIMICA Y DIFERENCIA DE LA TECNICAS HISTOLOGICAS, DIFERENCIA CDOLORACIONES POR HISTOQUIMICA
VIII. PRACTICAS



INTRODUCCION:
LA TECNICA HISTOLOGICA COMPRENDE LA PREPARACION DE LOS TEJIDOS PARA SU ESTUDIO MICROSCOPIO LO CUAL SE LOGRA SOMETIENDO A LA TOTALIDAD O A UNA PARTE SELECCIONADA DEL TEJIDO POR EXAMINAR A UNA SERIA DE PROCESOS: FIJACION, DESHIDRATACION,ACLARAMIENTO, INCLUSION, TINCION Y MONTAJE.




ETAPAS
FINALIDADES
DURACION
1.FIJACION EN FIJADOR SIMPLE O EN MEZCLA FIJADORA ( LIQUIDO DE BOUIN, HELLY, ETC
CONSERVAR LA MPRFOLOGIA Y LA COMPOSICION DE LOS TEJIDOS
CERCA DE 12 HRS, DEPENDIENDO DEL FIJADORY DEL TAMAÑO DE LAPIEZA ( ESPECIMEN)
2. DESHIDRATACION EN ALCOHOL ETILICO DE CONCENTRACIONES XRECIENTES, EMPEZANDO CON EL DE 70° Y TERMINANDOCON ALCOHOL ABSOLUTO.
ELIMINAR EL AGUA DE LOS TEJIDOS
6 A 24 HRS, DEPENDIENDO DEL TAMAÑO DE LA PIEZA
3. ACLARAMIENTO O DIAFANIZACION EN BENZOL, XILOL O TOLUOL, SOLVENTES DEL ALCOHOL Y LA PARAFINA
EMBEBER LA PIEZA CON UNA SUSTANCIA MICIBLE CON LA PARAFINA
1 A 6 HRS DEPENDIENDO DEL TAMAÑO DE LA PIEZA
4. INCLUSION CON PARAFINA FUNDIDA, GENERALMENTE REALIZADA EN ESTUFA A 60°C
LA PARAFINA PENETRAEN LOD VASOS EN LOS ESPACION INTRACELULARES Y TAMBIEN EN EL INTERIOR DE LAS CELULAS EMBEBIENDO EL TEJIDO Y HACIENDO MAS FACIL LA OBTENCION DE CORTE ENEL MICROTOMO
30 MIN A 6 HRS DEPENDIENDO DEL TAMAÑO DE LA PIEZA
5. CONFECCION DE BLOQUE: LA PIEZA SE COLOCA EN UN MOLDE RECTANGULAR QUE CONTIENE PARAFINA FUNDIDA
OBTENCION DEL BLOQUE DE PARAFINA DE FORMA REGULAR, PARA SER CORTADO EN EL MICROTOPara empezar von la técnica histológica se debe obtener una muestra del tejido a estudiar y existen 2 formas
1. Necropsia: examen u obtención de tejido de un organismo muerto
2. Biopsia: examen u obtención de tejido de un organismo vivo. puede ser inscisional, excisional, por sacabocado, por punción y absorción, por raspado, por trepanación.

Fijación: Este proceso se refiere al tratamientodel tejido con sustancias químicas que tienen varias finalidades.
Conservar los tejidos de forma que muestren el mayor parecido posible a su esto en vivo
Aumentar la dureza del tejido para facilitar la preparación de finas películas de este
Destruir bacterias y gérmenes que pudieran encontrarse en ellos.
Interrumpir los procesos celulares dinámicos que ocurren a la muerte de la célula
Estose logra al inactivar ciertas enzimas celulares que de otra manera iniciaría la autolisis y llevaría a la degeneración post mortem. La fijación mantiene las estructuras al estimular la formación de enlaces cruzados entre proteínas

Deshidratación:
Después que las muestras han sido fijadas se elimina el fijador y se deshidratan debido a que una gran parte del tejido está constituido por agua seaplica una serie gradual de soluciones acuosas de menos a mayor de agentes deshidratantes, por ejemplo alcohol etílico o acetona. Iniciando con alcohol al 50%, luego con una solución de 60%, 70%, 80%, 90%, 96% y alcanzando de manera paulatina el alcohol al 100% del alcohol inmediatamente, el agua saldría muy rápida del tejido y se deformaría.






Aclaramiento (desalcoholización):
Permiteque el alcohol de los tejidos sea reemplazado por un líquido que disuelve la parafina con la cual el tejido va a ser impregnado. Sin embargo no todos los agentes desalcoholizantes pueden actuar como aclarantes y viceversa. La mayoría de las substancias verdaderamente aclarantes son aceites esenciales. Los buenos agentes aclarantes deben eliminar pronto el alcohol y aclarar rápidamente sin...