Test De Adenosina Ddeaminasa (Ada) En Liquido Cefaloraquideo

PRACTICA DE BIOQUIMICA

TEST DE ADENOSINA DDEAMINASA (ADA) en liquido cefaloraquideo
FUNDAMENTO DEL METODO
La adenosina deaminasa ADA , reacciona con adenosina para producir inosina+amoniacoADA
Adenosina+ H2O Inosina + NH3

Los ionesamonio que se forman se valoran por el método de Berthelot, donde el amoníaco en presencia de una base reacciona con el fenol e hipoclorito de sodio, formando azul de indofenol.

VALORES DE REFERENCIALíquido Cefalorraquídeo 0 – 6 U/L

REACTIVOS
*Buffer Fosfato pH 6.5
Solución bufferada de fosfato de sodio.
Conservar de 2 a 8 C

* Solución de Adenosina
Solución bufferada yestabilizada de Adenosina.
Conservar a temperatura ambiente.
NOTA.- Si se observa alguna precipitación, llevar a baño maría (70 C) hasta su homogenización.


*Solución de Sulfato de Amonio (50U/L)Solución patrón de sulfato de amonio calibrada y estabilizada.
Conservar a 2 a 8 C

*Reactivo Color 1
Solución de fenol y nitroprusiato de sodio.
Conservar de 2 a 8 C

*Reactivo Color 2Solución alcalina de hipoclorito de sodio.
Conservar a temperatura ambiente.

Procedimiento para determinar ADA en suero o líquidos biológicos

( 1 ) ( 2 )( 3 ) ( 4 )




Blanco Reactivo Standard Blanco Muestra Muestra

Agregar 0.5 ml deBuffer Fosfato al tubo Blanco Reactivo (1)
Agregar 0.5 ml de Solución Adenosina al tubo Blanco Muestra (3) y al tubo Muestra (4)
Agregar 0.5 ml de Standard al tubo Standard (2)
Agregar 0.025 ml demuestra al tubo Muestra (4)
Agregar 0.025 ml de agua destilada al tubo Blanco de Reactivo (1) y al tubo Standard (2)
Blanco Reactivo
(ml) Standard
(ml) Blanco Muestra...