Tinción de Ziehl Neelsen

Tinción de Ziehl Neelsen
La
tinción de Ziehl-Neelsen
(
BAAR
) es una técnica de tinción diferencialrápida y económica, para la identificación de microorganismos patógenos, por ejemplo
M.tuberculosis
.Fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes, Franz Ziehl (1859 a1926), un bacteriólogo y Friedrich Neelsen (1854 to 1894), un patólogo.
1.- Fundamento
Este método se basa enque las paredes celulares de ciertos parásitos ybacterias contienen ácido graso|ácidos grasos (por ejemplo, el ácido micólico)de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedadderesistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantesbásicos. Por esto se denominan ácido-alcohol resistencia|bacilos ácido-alcoholresistentes o BAAR. LasMycobacterium|micobacterias como
Mycobacteriumtuberculosis|M. tuberculosis
y
Mycobacterium marinum|M. marinum
y losparásitos coco (bacteria)|coccídeos como
Cryptosporidium
se caracterizan por sus propiedades deácido-alcohol resistencia. La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la paredbacteriana que contiene ceras.
2.- Técnica
Esta técnica puederealizarse tanto en muestras histológicas como citológicas.
2.1 - Variante histológica
Para demostrar la presencia de BAAR en cortes de tejido en parafina. Losreactivos necesarios para su realización sonlos siguientes:

Ácido periódico 5%

Carbol fucsina de Ziehl (fucsina fenicada). Preparar mezclando en elorden dado:a)0,5 g fucsina básicab)50 cc agua destiladac)5 cc etanol absolutod)2,5 gcristales de fenol derretidos

Hematoxilina

Alcohol ácido 1%:
a)
Alcohol de 70º
b)
Ácido clorhídricoEl procedimiento es el siguiente:
•
Desparafinar e hidratar los cortes
•
Ácido periódico5%, 10 min
•
Lavar con agua destilada
•
Fucsina fenicada, 15 min
•
Decolorar en alcohol ácido al 1%
•
Lavar con agua destilada
•
Hematoxilina, 10 min
•
Azulidificar con, por ejemplo,...