tincion de estructuras bacterianas: capsula y esporas




PRACTICA NO.4


“Tinción de estructuras Bacterianas: Cápsula y esporas
Tinción de Ziehl-Neelsen”

PROFESORA: M.en C. María Guadalupe Morales Meza

Q.F.B.T.


EQUIPO 8:
BARRALES HERNANDEZ CYNTHIA
MACIAS SANCHEZ DAYANA
GONZÁLEZ RODRÍGUEZ JESUS ABRAHAM

Objetivo: El alumno aprenderá la metodología para aplicar la tinción de cápsula, tinción de alcohol ácido resistentes ytinción de esporas: método de sheaffer y fulton.
Hipótesis: Diferenciaremos las distintas tinciones comprobando los resultados con datos teóricos el método de sheaffer y fulton: al observara al microscopis las esporas se teñirán de verde y el resto de la célula de rojo, tinción de cápsula: al observar las células bacterianas se observaran teñidas de rojo y las cápsulas se observaran al microscopiocomo halos transparentes alrededor de la bacteria sobre un fondo negro y método de ziehl-neelsen al observar al microscopio: las bacterias alcohol ácido resistentes positivas se tiñen de rojo y las negativas de azul.

Introducción:
El tamaño de la mayoría de las células bacterianas es tal que resultan difíciles de ver con el microscopio óptico. La principal dificultad es la falta de contrasteentre la célula y el medio que la rodea y la forma más simple de aumentar el contraste es la utilización de colorantes. Estos pueden emplearse para distinguir entre tipos diferentes de células o para revelar la presencia de determinados constituyentes celulares, tales como flagelos, esporas, cápsulas, paredes celulares etc.
La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen algunaafinidad específica por los materiales celulares. Muchos colorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente (cationes) que se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos. Ejemplos de colorantes catiónicos son el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina. Otros colorantesson moléculas cargadas negativamente (aniones) y se combinan con los constituyentes celulares cargados positivamente, tales como muchas proteínas. Esos colorantes incluyen la eosina, la fucsina ácida y el rojo Congo. Otro grupo de colorantes son sustancias liposolubles; los colorantes de este grupo se combinan con los materiales lipídicos de la célula, usándose a menudo para revelar la localizaciónde los depósitos de grasa. Un ejemplo de colorante liposoluble es el negro Sudán.
Las tinciones en las células bacterianas únicamente tienen como fin diferenciar y hacer visibles algunas estructuras celulares presentes en las bacterias. Las ventajas de utilizar tinciones son: dar contraste entre el microorganismo y el medio que le rodea, con lo que se diferencian los distintos tipos morfológicos,permiten el estudio de estructuras intracelulares, permiten emplear mayores amplificaciones con lo que se identifican las diferentes estructuras. Los colorantes más utilizados son colorantes básicos que reaccionan con los compuestos cargados negativamente coloreando la estructura.
Las paredes celulares de ciertas bacterias contienen ácidos grasos (ácidos micólicos) de cadena larga (50 a 90átomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos, por esto se denominan ácido-alcohol resistentes. Las microbacterias como M. tuberculosis se
caracterizan por sus propiedades de ácido-alcohol resistencia. La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la paredbacteriana que contiene ceras.
Algunos géneros bacterianos, entre los que destacan Clostridium y Bacillus, producen en su interior formas de resistencia denominadas endosporas. Se producen cuando las condiciones ambientales son desfavorables (agotamiento de los nutrientes, temperaturas extremas, radiaciones, compuestos tóxicos, etc.) formándose una espora por cada forma vegetativa. Al finalizar el...