Todo Sobre el Chikungunya

Virus Chikungunya clones infecciosos y usos de los mismos

EP 1922084 A2 (texto de WO2008030220A2)
RESUMEN
La presente invención desarrollado y caracterizado in vitro e in vivo tres clones de ADNc de longitud completa basada en la chikungunya alfavirus, dos conjuntos de clones infecciosos basa en CHIKV y replicones basados ​​en el principio utilizado para generar los clones de infección.Descrito en este documento es el método para generar tales clones infecciosos, y replicones su composición y su uso como herramienta molecular, un vehículo de suministro y la vacuna.
1. Un vector de expresión, que comprende: una secuencia de ADN que codifica un virus Chikungunya de longitud completa que comprende los genes de proteínas no estructurales y genes de proteínas estructurales del virusde Chikungunya.

2. El vector de expresión de la reivindicación 1, en el que la secuencia de ADN que codifica los genes de las proteínas no estructurales se inserta en un plásmido y la secuencia de ADN que codifica los genes de proteínas estructurales se inserta en un segundo plásmido.

3. El vector de expresión de la reivindicación 1, en el que la secuencia de ADN que codifica los genes delas proteínas no estructurales se inserta en un plásmido, la secuencia de ADN que codifica los genes de la cápside de proteínas estructurales se inserta en un segundo plásmido y la secuencia de ADN que codifica el resto de la genes de proteínas estructurales se inserta en un tercer plásmido.

4. El vector de expresión de la reivindicación 1, donde la secuencia de ADN del virus chikungunya sederiva de la cepa 37997, Nagpur (India) 653.496 cepa, cepa prototipo S27- africana, θf cepa Ross o LR2006 aislados de LaReunion cepa del virus Chikungunya.

5. El vector de expresión de la reivindicación 1, que comprende además: un gen heterólogo, un gen knock-out, un gen de sobre-expresión o una secuencia inmunogénica.

6. Una célula huésped que comprende y expresando el vector de expresiónde la reivindicación
7. Un clon infeccioso que comprende el ADN de la reivindicación 1.
8. El clon infeccioso de la reivindicación 7, en el que el clon codifica un virus de Chikungunya atenuada.
31
9. Una composición farmacéutica que comprende el virus Chikungunya atenuada codificada por el clon de la reivindicación 7, una secuencia de ADN que codifica una proteína de interés expresada porel clon y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
10. La composición farmacéutica de la reivindicación 9, en el que la secuencia de ADN que codifica la proteína de interés es la secuencia de ADN de un gen heterólogo, una sobre-expresado gen, knockout / gen desmontables o un péptido inmunogénico.
11. Una composición inmunogénica que comprende: un virus Chikungunya viva atenuada codificada porun clon de la reivindicación 7 y una secuencia de ADN que codifica un péptido inmunogénico expresado por el clon.
12. Una composición inmunogénica, que comprende: un virus Chikungunya atenuada codificada por el clon de la reivindicación 7, en el que el virus Chikungunya atenuado se inactiva y una secuencia de ADN que codifica un péptido inmunogénico expresado por el clon.
13. Un método de lafunción de un gen evaluar en un organismo, que comprende: expresar el gen o la anulación del gen de interés utilizando el clon de la reivindicación 7; y determinar el efecto de la sobre-expresión o la anulación del gen en el organismo, evaluando de esta manera la función del gen en el organismo.
14. Un método para inducir una respuesta inmune protectora en un sujeto, que comprende: administrarcantidades farmacéuticamente eficaces de la composición inmunogénica de la reivindicación 11, induciendo de ese modo una respuesta inmune protectora en el sujeto.
15. El método de la reivindicación 14, en el que el sujeto es un humano o un primate no humano.
16. Un método para inducir una respuesta inmune protectora en un sujeto, que comprende: administrar cantidades farmacéuticamente...