Transaminasas200 Sp

Transaminasas 200
Para la determinación de Transaminasa Glutámico Oxalacética
(GOT(AST) y Transaminasa Glutámico Pirúvica (GPT/ALT)

SIGNIFICACION CLINICA
Las transaminasas GOT y GPT son enzimas ampliamente
difundidas en el organismo con elevada concentración en
corazón, hígado, músculo esquelético, riñón y eritrocitos.
La actividad sérica en condiciones normales es baja o
nula.
Un daño oenfermedad en cualquiera de estos tejidos
conduce a un aumento en los niveles séricos. Así, luego de
un infarto de miocardio se produce en suero un marcado
aumento de la actividad de GOT (abundante en músculo
cardíaco).
En hepatitis virales y otras formas de enfermedad hepática
que involucren necrosis tisular, predominará la actividad
sérica de GPT (abundante en tejido hepático).
Una elevada actividad detransaminasas puede detectarse
también en traumas accidentales o quirúrgicos y en distrofias
musculares o miositis.
FUNDAMENTOS DEL METODO
La GOT cataliza la siguiente reacción:

GOT
l-aspartato + α-cetoglutarato
glutamato + oxalacetato
La GPT cataliza la siguiente reacción:

GPT
l-alanina + α-cetoglutarato
glutamato + piruvato
El piruvato formado (el oxalacetato es inestable y se transformaen piruvato), reacciona con la 2,4-dinitrofenilhidracina
produciéndose, en medio alcalino, un compuesto coloreado
que se mide a 505 nm.
REACTIVOS PROVISTOS
- Transaminasas 200 GOT provee:
A. Reactivo A: solución con 100 mM de l-aspartato y 2 mM
de α-cetoglutarato en buffer fosfatos 100 mM, pH 7,4.
- Transaminasas 200 GPT provee:
A. Reactivo A: solución con 200 mM de dl-alanina y 2 mM
deα-cetoglutarato en buffer fosfatos 100 mM, pH 7,4.
Además, ambos equipos proveen:
B. Reactivo B: solución conteniendo 1 mmol de 2,4-dinitrofenilhidracina (2,4-DNFH) en ácido clorhídrico 1 mol/l.
C. Reactivo C: solución de hidróxido de sodio 4 mol/l.
S. Standard: solución de piruvato de sodio 2 mmol/l. Para
efectuar la curva de calibración.
REACTIVOS NO PROVISTOS
Agua destilada.

INSTRUCCIONES PARA SU USOReactivo A (GOT o GPT): listo para usar.
Reactivo B: listo para usar.
Reactivo C diluido (0,40 mol/l); preparación:
- Trasvasar el contenido del frasco a un matraz de l litro.
- Lavar el frasco con un pequeño volumen de agua destilada y
pasar el líquido de lavado al matraz. Repetir esta operación
3-4 veces.
- Diluir con agua destilada hasta el aforo. Tapar y mezclar
bien por inversión.
- Envasar enun frasco de plástico de buen cierre (no utilizar
frasco de vidrio).
Standard: listo para usar en la curva de GPT. Diluir 1:2 con
Reactivo A para la curva de GOT.
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
Reactivo B: corrosivo. R36/38: irrita los ojos y la piel. S24/25:
evítese el contacto con los ojos y la piel. S26/28: en caso
de contacto con los ojos y la piel, lávenseinmediatamente
y abundantemente con agua y acúdase a un médico. S37:
usar guantes adecuados.
Reactivo C: irritante. R36/38: irrita los ojos y la piel. S26/28:
en caso de contacto con ojos y piel, lávense inmediatamente
y abundantemente con agua y acúdase a un médico. S37/39:
usar guantes adecuados y protección para los ojos/la cara.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
detrabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
acuerdo a la normativa local vigente.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: estables a temperatura ambiente (<
25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS
Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado acero con
agua destilada, lecturas del Blanco inferiores a 0,270 D.O.
a 505 nm son indicio de deterioro del mismo. También indica
deterioro la aparición de turbidez.
MUESTRA
Suero
a) Recolección: se debe obtener suero de la manera usual.
No es necesario que el paciente esté en ayunas para la
extracción de sangre.

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b) Aditivos: no se requieren.
c) Sustancias interferentes...