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PRACTICAS DE MICROBIOLOGIA


INDICE
Página
Introducción y observaciones preliminares 1
Material por pareja 2
Medios de cultivo 3
Esterilización 4
Siembra de microorganismos 5
Fermentación de azúcares 6
Observación de las bacterias 6
Ensayos bioquímicos estandarizados 8
Antibiosis 9
Actividad catalasa 11Análisis microbiológico de aguas contaminadas 11
Transferencia genética entre bacterias Gram negativas
Conjugación 13
Transformación 14
Titulación de un virus bacteriano y Transducción 15
Crecimiento bacteriano 17
Aislamiento de bacterias lácticas y producción de yogur 18


OBJETIVOS


El objetivo de estas prácticas consiste en familiarizar al alumno conalgunas de las técnicas más comúnmente utilizadas en los laboratorios de Microbiología y permitir la observación experimental de los conceptos aprendidos durante las clases de teoría.


NORMAS DE SEGURIDAD

Aunque los microorganismos que vamos a manejar no son patógenos habituales, su ingestión masiva o el contacto con heridas puede provocar diversos problemas. Por ello hay que seguir unascuantas normas de seguridad:
1) No se puede fumar ni comer en el laboratorio
2) Es obligatorio la utilización de la bata
3) La ropa y los objetos personales no deben mantenerse cerca de las zonas de trabajo
4) Al comenzar las prácticas conviene colocar un papel de filtro sobre la zona de manipulación, y retirarlo al terminar el día.
5) Lavarse las manos cuidadosamente antes de salir del laboratorioCALIFICACIÓN

Cada alumno deberá completar un cuaderno donde anotará con detalle los fundamentos de la práctica correspondiente, los resultados obtenidos y la explicación de éstos.
ORGANIZACION

Las prácticas se desarrollarán por parejas en dos periodos de una semana cada uno. El programa diario que se describe a continuación puede ser sujeto a modificaciones dependiendo delcalendario concreto de cada grupo.



Lunes
Martes
Miércoles
Jueves
Viernes




SEMANA 1

Preparación de medios de Cultivo





Siembra


Siembra Antib.
OMac.
OMic.I

Siembra API
Antib.
OMicII

Rdo. API
Rdo. antib.
Catalasa
Rdo.BacProb
Siembra Yogur



SEMANA 2



AnAguasI
Conjug. I
Transformación I
Inoculación Leche


AnAguasII
Conjug.IITransformaciónII
AnYogur



AnAguas III
Rdo. Conjug.
Rdo. Transf.
TVirus
Transduc.

Rdo TVirus
Rdo. Transduc.
CrecBact.

SEMINARIO
Abreviaturas. An.AguasI, II, III, Rdo.) Análisis de aguas y resultados; Antib.) Antibiosis; Rdo.Antib) Resultado antibiosis; Conjug.I,II, Rdo.) Conjugación y resultados; CrecBact.) Crecimiento bacteriano; OMac) Observación macroscópica: OMicI) Observación porcontraste de fases y tinción de Gram; RdoBacProb) Resultados de identificación de la bacteria problema. OMicII) Tinción de esporas; TVirus) Titulación de un virus bacteriófago; API) Ensayos bioquímicos estandarizados. Transduc) Transducción. AnYogur) Análisis microscópico de yogur.


MATERIAL POR PAREJA

A cada pareja se le asignará una clave consistente en el número de la mesa seguido de unaletra de la A a la D y dispondrá de una taquilla numerada. En esa taquilla debe de encontrarse el material para prácticas que se indica en el listado, y es responsabilidad de cada pareja comprobar su estado al principio de la práctica y asegurarse de que queda completo una vez concluidas éstas. Diariamente hay que abrir la taquilla con la llave localizada en el tablero junto a las pizarras ( ¡nodejeis las llaves puestas en los candados porque se doblan!).

Equipo:

Un trípode Rejilla para trípode
Un cristalizador Un puente de tinción
Unas pinzas Un asa de siembra
Un rotulador Un Microscopio
Una Propipeta

Colección de colorantes y reactivos.

Cristal violeta Lugol
Safranina Azul de metileno
Verde malaquita Etanol
Frasco lavador con agua...