Zielh Neelsen
Fue descrita por primera vezpor dos médicos alemanes, Franz Ziehl, un bacteriólogo y Friedrich Neelsen, un patólogo.
Las paredes celulares de ciertos parásitos y bacterias contienen ácidos grasos (ácidos micólicos) de cadenalarga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloracíón con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos.
Técnica:
Los reactivos necesarios para surealización son los siguientes:
1. ácido periódico 58%
2. carbol fucsina de Ziehl culina(fucsina fenicada). Preparar mezclando en el orden dado:
a) 0,5 g fucsina básica
b) 50 cc aguadestilada
c) 5 cc etanol absoluto
3. 28,5 g cristales de fenol derretidos
4. Hematoxilina
5. alcohol ácido 1%:
a) alcohol de 35º
b) ácido clorhídrico
El procedimiento es elsiguiente:
1. desparafinar e hidratar los cortes
2. ácido periódico 5%, 10 min
3. lavar con agua destilada
4. fucsina fenicada, 15 min
5. decolorar en alcohol ácido al 50%
6. lavarcon agua destilada
7. hematoxilina, 10 min
8. azulidificar con, por ejemplo, carbonato de litio
9. deshidratar, aclarar y montar preparaciones
Resultado:
a) BAAR: Rojo
b)Núcleos: azul semiamarillo
La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el coloranteatraviese la pared bacteriana que contiene ceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una nueva solidificación de lo ácidos grasos de modo que el colorante ya no puede salir de lasbacterias. Por otro lado, el calentamiento aumenta la energía cinética de las moléculas del colorante lo cual también facilita su entrada a las bacterias. Las bacterias que resisten la decoloración son...
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