co´pocultivo

Coprocultivo

‍1 – OBJETIVO

Identificar las posibles especies patógenas de microorganismos presentes en las vías gastrointestinales (Heces) a través del coprocultivo y de sus reacciones bioquímicas.

‍2 - FUNDAMENTO
La porción inferior del intestino tiene una flora bacteriana normal excesivamente amplia. Los microorganismos con mayor prevalencia son los anaerobios ( Bacteroides,bácilos gram positivos, Estreptococos), microorganismos entéricos gran negativos y Enterococcus faecalis. Cualquier intento por aislar bacterias patógenas de las heces implica la separación de las especies patógenas, usualmente a través del empleo de medios selectivos diferenciales y de cultivos enriquecidos. Las principales causas de trastornos gastrointestinales agudos incluyen a los virus, las toxinas(de: Estafilococos, Vibriones, Escherichia coli ), bacilos entéricos gran negativos invasores, los fermentadores lentos de la lactosa, la Shigella, la Salmonella y la Campilobacterias. La importancia relativa de estos grupos tiene grandes discrepancias en las distintas partes del mundo.
Las heces y los raspados rectales son los especimenes de que se dispone con mayor facilidad. Debe anotarse, enel examen macrocópico la presencia de sangre, moco o helmintos en la inspección inicial. Se suspenden los especímenes en un caldo selectivo como el Caldo de Tetrationato y se cultivan sobre medios ordinarios así como en medios selectivos diferenciales, por ejemplo Agar EMB, Agar McConkey, Agar S-S, para permitir la separación de los bacilos gran negativos que no fermentan la lactosa de otrasbacterias entéricas comunes.
Los frotis teñidos pueden revelar una prevalencia de leucocitos y de ciertos microorganismos anormales como Cándida o estafilococos, pero no pueden utilizarse para diferenciar las bacterias entéricas patógenas de las de la flora normal, por lo que deben realizarse otro tipo de pruebas para discriminar los tipos de bacterias presentes en la muestra como son las pruebasbioquímicas.

‍3. MATERIAL


•Agua destilada
•Gradilla
•Tubos de ensayo
•Asa de siembra desechable y normales
•Hisopo
•Papel de filtro
•Pipetas de vidrio
•Medios de cultivo
•Pinzas metálicas
•Alcohol
•Algodón graso
•Vaso de precipitado
•Mechero Bunsen
•Portaobjetos
•Cubreobjetos
•Microscopio
•Cubeta de tinción
•Pinzas de madera
•Frasco lavador


‍3.2 Reactivos:
•Medios decultivo para aislamiento:
– agar sangre
– agar Mc Conkey
– Agar entérico Hektoen (HK)

•Medios para pruebas bioquímicas:
- Agar Christensen
- KIA

•Colorantes para tincion de Gram: lugol, cristal violeta, fucsina básica, alcohol
•Lugol o Negro sudán

‍3.3 Muestras:
Muestra: heces de adulto.


‍4. PROCEDIMIENTO
El procedimiento fue el siguiente:


1.Recogida de la muestraPreparación o indicaciones del paciente:

Se debe seguir con el régimen habitual de comidas.

a. para niños/as
Para bebés y niños pequeños que usan pañales:
Se puede cubrir el pañal con un envoltorio plástico. Si se coloca correctamente el envoltorio plástico, separando las heces de la orina, se puede evitar que éstas se mezclen con el fin de obtener una muestra mejor.

b. para adultosHay muchas maneras de recolectar las muestras. Se pueden recoger las heces con la ayuda de un envoltorio plástico que se coloca suelto sobre el inodoro y se sostiene en su lugar con el asiento. Luego se coloca la muestra en un recipiente limpio. El equipo para recolección de la muestra trae una gasa especial que se usa para recogerla y luego se coloca la muestra en un recipiente limpio.


B.Condiciones para la toma de muestras
Heces que no tengan más de media hora de obtenidas, o muestras tomadas directamente del recto con un hisopo de algodón. Cuando las siembras no se pueden efectuar de inmediato o la muestra demora en llegar al laboratorio, se aconseja emulsionar aproximadamente 1g de heces en 1º ml de un líquido conservador, o bien, depositar en éste el hisopo rectal.

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