T Cnicas De Estudio Celular

Universidad Juárez Autónoma de Tabasco
División Académica de Ciencias Básicas



Herramientas, técnicas y/o estrategias empleadas para el estudio de las células

Asignatura:
Laboratorio de Análisis Químico e Instrumental

Catedrático:
Juan Carlos Arévalo Pérez

Alumna:
Nohema Yareli Vázquez Domínguez

Carrera:
Químico Farmacéutico Biólogo

2do semestre Grupo: “B”


Cunduacán,Tabasco 11 de febrero de 2015
Biología celular y molecular
El desarrollo de la biología celular y molecular se produce en forma paralela a la invención de instrumentos y técnicas biofísicas y bioquímicas que extienden los sentidos a nuevos límites y acrecientan el conocimiento de la estructura y funcionamiento de la célula. El acceso a este tipo deconocimiento resulta dificultoso pues las células son pequeñas y transparentes. El ojo humano sólo puede discriminar dos puntos separados por más de 0,1 mm ó 100 micrómetros (mm). La mayoría de las células son mucho más pequeñas y se necesita del microscopio óptico cuyo límite de resolución es de 0,2 mm. Para estructuras más pequeñas, que midan entre 0,4 y 200 nanómetros (nm), se requiere delmicroscopio electrónico. Sin embargo además del microscopio, se han utilizado otras técnicas o herramientas estratégicas para no detenerse y continuar con su investigación.
Aislamiento
La Biología Celular actual desarrolla la integración de la Citología con la Bioquímica, es decir el estudio de la estructura celular junto con el análisis de los procesos químicos de la vida (metabolismo).Fraccionamiento celular
El fraccionamiento celular ha sido parte importante del estudio de la citología y sus procesos químicos. El objetivo del fraccionamiento celular es disgregar las células separando las organelas principales de modo que, sus funciones individuales puedan ser estudiadas.
El instrumento usado para fraccionar las células es la centrífuga capaz de girar a diversas velocidades. La máspoderosa, llamada ultracentrífuga puede dar vueltas tan rápidamente como 80000 revoluciones por minuto (RPM) y aplicar fuerzas sobre las partículas de 500000 veces mayores que la fuerza de la gravedad (500000g)

El fraccionamiento celular comienza con la homogeneización, o sea la ruptura de la célula. El objetivo es romper las células sin dañar severamente sus organelas. El homogenato se centrifugalográndose la separación de las partes de la célula en dos fracciones: el pellet que consiste en las estructuras más grandes depositadas en el fondo del tubo y el sobrenadante constituido de partes más pequeñas suspendidas en el líquido por encima del pellet. El sobrenadante es transvasado a otro tubo y centrifugado otra vez. El proceso es repetido incrementando la velocidad en cada paso. De estamanera se consigue recolectar componentes más pequeños de los sucesivos pellets.










El fraccionamiento celular permite preparar los componentes específicos de la célula tanto cualitativa como cuantitativamente. Estas poblaciones celulares pueden ser separadas por el citómetro de flujo.








Este instrumento posee un tubo muy delgado por donde se hacen pasar a las células una tras otra. Undeterminado tipo celular emitirá fluorescencia, previo tratamiento con fluorocromo, que es un pigmento fluorescente. Esto permite la discriminación y, por lo tanto, la separación de las células así tratadas de acuerdo a la fluorescencia que emitan.













Cultivo celular (células vivas)
Con el objetivo de preservar toda la información que sea posible sobre todos los tipos celulares, se handesarrollado técnicas de disociación de las células.
En los primeros tiempos, la técnica consistía en colocar un explante de un pequeño trozo de tejido en un medio compuesto por suero sanguíneo, extracto de embriones y solución salina. Hoy se conocen los requerimientos nutricios de las células eucariontes, entonces se les mantienen y hacen crecer en un medio sintético enriquecido de suero. Se...