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I) Biomoléculas

1) Métodos de estudio de la célula

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MÉTODOS DE ESTUDIO DE LA CÉLULA

CLASIFICACIÓN
Clasificaremos los métodos que se utilizan para el estudio de la célula en dos grandes
grupos:
I) Técnicas para el estudio fisicoquímico: sirven para conocer la composición y relacionar esta
composición con las estructuras celulares. Estos métodos son:
a) Centrifugación
b) Cromatografía
c)Electroforesis
d) Cultivos "in vitro"
II) Técnicas para el estudio morfológico de la célula. Nos permiten conocer cómo es su forma,
su tamaño y su estructura. Son, fundamentalmente:
a) Microscopía óptica
b) Microscopía electrónica
1) Microscopio electrónico de Trasmisión (MET)
2) Microscopio electrónico de barrido (MEB)

I) TÉCNICAS PARA EL ESTUDIO FISICOQUÍMICO DE LA CÉLULA
Este tipo de métodos seutilizan para el aislamiento, localización e identificación de las
sustancias que constituyen la materia viva.
Presentan dos problemas principalmente:
a) Los componentes de un ser vivo se encuentran formando mezclas muy complejas.
b) La mayoría de las sustancias que encontramos en los seres vivos son, a su vez, de una
gran complejidad.
Pensemos,por ejemplo, que una sola de los varios miles deproteínas que contiene una célula
puede estar formada por más 5000 aminoácidos.
Pasemos a continuación al estudio de cada uno de estos métodos.

J. L. Sánchez Guillén

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1) Métodos de estudio de la célula

A) CENTRIFUGACIÓN
Consiste en la separación de los componentes
de una mezcla en función de las diferencias entre
las velocidades que presentan al someterlos a
elevadasaceleraciones (g). Esto se consigue
haciendo girar la mezcla en un rotor a un gran
número de vueltas por minuto. Los aparatos
empleados con este fin se denominan
ultracentrífugas.
Esta técnica requiere los siguientes pasos:
1) FRACCIONAMIENTO U HOMOGENEIZACIÓN: El material biológico, por ejemplo: un
fragmento de tejido del hígado, es triturado para
disgregarlo y romper las membranas celulares.

Fig.1 Homogeneizador.

La rotura de las membranas deja en libertad los
orgánulos celulares y el contenido del
hialoplasma. Si la homogeneización se realiza
suavemente, los orgánulos permanecerán
intactos. Obtendremos así una "papilla" que
estará compuesta de restos de membranas,
orgánulos celulares, núcleos, moléculas libres y
agua.
Fig. 2 Centrífuga.

2) CENTRIFUGACIÓN: Las ultracentrífugas sonmáquinas que consiguen velocidades de rotación
muy elevadas, hasta 500.000 v/mn. En el interior
de estos aparatos se alcanzan grandes
aceleraciones que se miden en g (1g=9,8 m/s2).
En una ultracentrífuga pueden alcanzarse hasta
100.000 g. Los materiales biológicos sometidos a
estas aceleraciones se desplazan hacia el fondo
de los recipientes que los contienen con
velocidades que dependen de su masa, desu
forma y volumen, y de la naturaleza del medio en
el que se realice la centrifugación.
B) CROMATOGRAFÍA

Fig. 3 Cromatografía de papel.

Se fundamenta en la separación de los
componentes de una mezcla por sus diferencias
de absorción. Éstas diferencias van a ser debidas
a las fuerzas de Van der Wals que se establecen
entre los componentes de la mezcla y una
sustancia que actúa de faseestacionaria. Según
la naturaleza de la fase estacionaria, tendremos
los siguientes tipos de cromatografía:
1) CROMATOGRAFÍA SOBRE PAPEL:
Se
emplea para la separación de sustancias
químicas que presenten propiedades muy
Fig. 4 Cromatografía de gases.
parecidas. Se opera de la siguiente manera. Una
pequeña cantidad de la mezcla a separar se
deposita sobre un fragmento de papel poroso en el que quedaráembebida. A continuación se

J. L. Sánchez Guillén

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1) Métodos de estudio de la célula

introduce el borde del papel en una sustancia en la que sean solubles los componentes de la
mezcla que queremos separar. El disolvente se desplazará por capilaridad y los irá
arrastrando. Los componentes de la mezcla viajarán más o menos rápido según establezcan
fuerzas más o menos...