aislamiento de microorganismos

AISLAMIENTO, EVALUACIÓN Y SELECCIÓN DE MICROORGANISMOS
TOLERANTES A ETANOL
Pontificia Universidad Javeriana
Departamento de Microbiología – Facultad de ciencias
Laboratorio Biotecnología Industrial
06 de Marzo del 2013

Objetivo. Aislar cepas microbianas que puedan representar una alternativa, en la
tolerancia a diferentes concentraciones de etanol y diferentes concentraciones deglucosa. Materiales y métodos. Al desarrollar la práctica se tomaron 10g de la
muestra a analizar (uvas), esto se adiciono a un frasco que contenía 90mL de
agua peptonada que correspondía a la dilución 10 -1, a partir de esta se realizaron
diluciones seriadas 10-2 y 10-3 adicionando 0.5mL a tubos que contenían 4.5mL de
agua peptonada. De las diluciones 10 -2 y 10-3 se realizaron siembras ensuperficie
en el medio YPG y se llevo a incubación a 30°C por 48 horas. De la dilución 10 -2
se tomo 0.1mL y sembró en medio YPG a diferentes concentraciones de etanol y
de la dilución 10-3 se sembró en glucosa (4%, 8% y 12%) luego se llevo a incubar
30°C por 48 horas. Resultados. Los resultados obtenidos fueron divididos, en
resistentes a concentraciones de etanol y resistentes concentraciones deglucosa,
obteniendo diversidad de microorganismos como levaduras, bacilos Gram
negativos, bacilos Gram positivos y cocos Gram positivos. Conclusiones. La
presencia de levaduras, bacilos y cocos presentes en las bebidas fermentadas
masato, chicha, guarapo, uvas y miel de plaza tiene la capacidad de resistir
dichas concentraciones de etanol y de glucosa, permitiendo su crecimiento y así
suaislamiento.
Palabras claves: tolerancia, fermentación, glucosa y etanol
INTRODUCCIÓN
En la enología, o ciencia y arte de la
producción
de
vinos,
un
microorganismo resistente a las altas
concentraciones
de
etanol
es
esencial. Esto debido a que el
microorganismo fermentador, quien
es el productor del alcohol, tiene que

soportar estas condiciones, buscando
una mayor producción o entérminos
económicos optimización de los
procesos industriales, se ha generado
toda una gama de investigaciones,
para encontrar un microorganismo
más apto, tolerante y resistente a
diferentes concentraciones de etanol
y de glucosa. (1)

La composición de la membrana del
microorganismo es el principal
elemento de interacción entre este y
el etanol, la membrana compuesta de
glucanos,azucares, ácidos grasos y
compuestos derivados del ergosterol;
para
el
caso
especifico
de
Saccharomyces
cerevisiae,
el
ergosterol y los hopanoides son
compuestos que le dan rigidez a la
membrana
y
son
los
que
directamente interactúan con los
alcoholes como el etanol debido a su
naturaleza química, el alcohol es un
metabolito secundario que sale de la
membrana de la levadura pordifusión
simple (2).
En esta práctica se usaron muestras
fermentadas de (masato, chicha,
guarapo, miel de plaza y uvas), para
aislar microorganismos resistentes a
diferentes
concentraciones
de
sustratos
(glucosa y etanol). En
bebidas como el masato este es un
concepto bastante importante, ya que
esta bebida es de alta producción
suramericana; su preparación es a
base de altas cantidadesde panela y
la producción de etanol en esta
bebida de tipo casero es significante
(2).

(masato, chicha, guarapo, miel) y
frutas (uvas).
Se pesaron 10g de las muestras
anteriores y se adicionaron a 90mL
de agua peptonada 0.1% (p/v) la cual
correspondería a la dilución 10-1, a
partir de esta se realizaron diluciones
seriadas
tomando
0.5mL
y
adicionándolos a tubos que contenían4.5mL de agua peptonada 0.1% (p/v)
10-2 y 10-3 luego se tomaron 0.1mL y
se realizo la siembra por superficie en
agar YPG y se llevaron a incubar por
48 horas a 30°C. (3)
Luego para evaluar la tolerancia a
etanol y a glucosa de los
microorganismos se sembró de
manera homogénea en superficie a
partir de la dilución 10-2 en medio
YPG con diferentes concentraciones:
Tolerancia a etanol....