Analisis Clinico
Páginas: 6 (1363 palabras)
Publicado: 24 de agosto de 2011
Universidad Autónoma de Yucatán
Facultad de Química
Asignatura:
Hematología
Fecha de entrega:
28 de marzo de 2011
INMUNOTIPIFICACION:
Es el proceso para determinar marcadores expresados en la superficie celular.
Esta detección se hace empleando anticuerpos monoclonales antígeno-específicos marcados con un fluorocromo dirigidos al marcador que se quiere evaluar.
Paraesto, es necesario aislar previamente las células a analizar (por ejemplo linfocitos, a partir de sangre total, por gradiente de ficoll). Las células son luego estimuladas a producir los marcadores poniéndolas en contacto con un antígeno capaz de estimular su síntesis.
Posteriormente estas son incubadas con una sustancia denominada brefeldina A (BFA) cuya función es impedir que las células expulsenlas citoquinas que están sintetizando, haciendo entonces que se acumulen en su interior. Después las células son fijadas, permeabilizadas y finalmente marcadas con los anticuerpos específicos. Una vez realizado este último procedimiento, las células están listas para ser leídas en el citómetro.
La citometría de flujo (CMF) es una técnica de análisis celular multiparametrico cuyo fundamentose basa en hacer pasar una suspensión de partículas (generalmente células) alineadas y de una en una por delante de un haz de láser focalizado. La citometría de flujo es una tecnología (proceso) que permite la medida simultánea de múltiples características físicas de una sola célula. Estas medidas son realizadas mientras las células (partículas) pasan en fila, a una velocidad de 500 a 4000células por segundo, a través del aparato de medida en una corriente de fluido.
Hemaglutinación
Las reacciones de aglutinación son realizadas para la tipificación de células sanguíneas. En la tipificación de los antígenos del sistema ABO, las células sanguíneas son mezcladas en una placa con un antisuero especifico para los antígenos A y B del grupo sanguíneo.
Si el antígeno está presente en lascélulas, éstas se aglutinaran, formando agregados visibles en la placa.
La determinación de los antígenos que están presentes en las células sanguíneas de un donador es básico para clasificar el tipo de sangre para las transfusiones.
Aunque la estructura física general de las personas es la misma, cada individuo es único. Cada persona posee identificadores en las células que permiten que el cuerporeconozca esas células como suyas. Los identificadores comunes e importantes son a y b, mientras que el tipo de sangre o designa la ausencia de los marcadores a y b. Existe otro identificador de superficie o antígeno en la superficie de los glóbulos rojos denominado factor rh, cuya presencia o ausencia es lo que identifica a la sangre como rh+ (positivo) o rh− (negativo).
El proceso detipificación ABO consta de dos pasos: tipificación directa e inversa. Inicialmente, la sangre se mezcla con suero anti−a (suero que contiene anticuerpos contra sangre tipo a), luego con suero anti−b (suero que contiene anticuerpos contra sangre tipo b). Una determinación del tipo de sangre se basa en el hecho de que la sangre se aglutine o no, ante la presencia de estos sueros. Las células sanguíneas sepueden unir sólo cuando el anticuerpo anti−a se une al antígeno a o el anticuerpo anti−b se une al antígeno b. Un técnico de laboratorio puede ver las células uniéndose cuando la sangre y el suero se mezclan en un tubo de ensayo.
El segundo paso implica mezclar el suero (porción líquida de la sangre sin células) con sangre del tipo a y del tipo b (ab). Con los resultados de estos dos pasos, sepuede determinar con exactitud el tipo de sangre de una persona.
Hemoclasificación.
Pruebas de especificidad de un anticuerpo monoclonal seleccionado
Podría identificarse un clon de hibridoma que produzca un anticuerpo monoclonal del isotipo IgM que mostrara las características de unión necesarias en el procedimiento de cribado. Se denomina 4B9. Un segundo anticuerpo 4B8 que reconoce el...
Facultad de Química
Asignatura:
Hematología
Fecha de entrega:
28 de marzo de 2011
INMUNOTIPIFICACION:
Es el proceso para determinar marcadores expresados en la superficie celular.
Esta detección se hace empleando anticuerpos monoclonales antígeno-específicos marcados con un fluorocromo dirigidos al marcador que se quiere evaluar.
Paraesto, es necesario aislar previamente las células a analizar (por ejemplo linfocitos, a partir de sangre total, por gradiente de ficoll). Las células son luego estimuladas a producir los marcadores poniéndolas en contacto con un antígeno capaz de estimular su síntesis.
Posteriormente estas son incubadas con una sustancia denominada brefeldina A (BFA) cuya función es impedir que las células expulsenlas citoquinas que están sintetizando, haciendo entonces que se acumulen en su interior. Después las células son fijadas, permeabilizadas y finalmente marcadas con los anticuerpos específicos. Una vez realizado este último procedimiento, las células están listas para ser leídas en el citómetro.
La citometría de flujo (CMF) es una técnica de análisis celular multiparametrico cuyo fundamentose basa en hacer pasar una suspensión de partículas (generalmente células) alineadas y de una en una por delante de un haz de láser focalizado. La citometría de flujo es una tecnología (proceso) que permite la medida simultánea de múltiples características físicas de una sola célula. Estas medidas son realizadas mientras las células (partículas) pasan en fila, a una velocidad de 500 a 4000células por segundo, a través del aparato de medida en una corriente de fluido.
Hemaglutinación
Las reacciones de aglutinación son realizadas para la tipificación de células sanguíneas. En la tipificación de los antígenos del sistema ABO, las células sanguíneas son mezcladas en una placa con un antisuero especifico para los antígenos A y B del grupo sanguíneo.
Si el antígeno está presente en lascélulas, éstas se aglutinaran, formando agregados visibles en la placa.
La determinación de los antígenos que están presentes en las células sanguíneas de un donador es básico para clasificar el tipo de sangre para las transfusiones.
Aunque la estructura física general de las personas es la misma, cada individuo es único. Cada persona posee identificadores en las células que permiten que el cuerporeconozca esas células como suyas. Los identificadores comunes e importantes son a y b, mientras que el tipo de sangre o designa la ausencia de los marcadores a y b. Existe otro identificador de superficie o antígeno en la superficie de los glóbulos rojos denominado factor rh, cuya presencia o ausencia es lo que identifica a la sangre como rh+ (positivo) o rh− (negativo).
El proceso detipificación ABO consta de dos pasos: tipificación directa e inversa. Inicialmente, la sangre se mezcla con suero anti−a (suero que contiene anticuerpos contra sangre tipo a), luego con suero anti−b (suero que contiene anticuerpos contra sangre tipo b). Una determinación del tipo de sangre se basa en el hecho de que la sangre se aglutine o no, ante la presencia de estos sueros. Las células sanguíneas sepueden unir sólo cuando el anticuerpo anti−a se une al antígeno a o el anticuerpo anti−b se une al antígeno b. Un técnico de laboratorio puede ver las células uniéndose cuando la sangre y el suero se mezclan en un tubo de ensayo.
El segundo paso implica mezclar el suero (porción líquida de la sangre sin células) con sangre del tipo a y del tipo b (ab). Con los resultados de estos dos pasos, sepuede determinar con exactitud el tipo de sangre de una persona.
Hemoclasificación.
Pruebas de especificidad de un anticuerpo monoclonal seleccionado
Podría identificarse un clon de hibridoma que produzca un anticuerpo monoclonal del isotipo IgM que mostrara las características de unión necesarias en el procedimiento de cribado. Se denomina 4B9. Un segundo anticuerpo 4B8 que reconoce el...
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