Anato 4

ANDREA HERNANDEZ POMPA
GPO. 2301 EQUIPO 3
INVESTIGACION PREVIA 4 “PROCESAMIENTO DE MUESTRAS HISTOLOGICAS”

La histotecnologia es la parte de la histología encargada de la obtención de cortes de muestras histológicas, bien sean tejidos vivos o inertes.
Las diversas técnicas para preparar los tejidos buscan que estas se asemejen a su estado viviente natural. Con este fin se han desarrollado unaserie de etapas consecutivas para el manejo de tejidos:
Obtención de la muestra
Fijación
Deshidratación
Aclaración e infiltración
Corte
Montaje
Tinción
OBTENCION DE LA MUESTRA
Existen diferentes tipos de procedimientos que oscilan desde el raspado de las capas más superficiales del tejido hasta la extracción completa del órgano por métodos quirúrgicos. Cuando se obtiene un órgano es necesarioobtener pequeños fragmentos llamados bloques, no debe exceder un centímetro en cualquier dimensión y tan pronto se le ha extraído debe estar en contacto con la solución fijadora.
FIJACION DEL TEJIDO
Tiene como objetivo preservar los tejidos deteniéndose la autolisis y además permitir que los tejidos permanezcan sin cambio luego de subsecuentes tratamientos.
De modo ideal los tejidos se endurecenligeramente, pero no se fragmentan permitiendo que las estructuras tisulares no se encojan y permanezcan en una disposición muy similar al estado in vivo. El proceso de fijación puede lograrse por inmersión o por perfusión. Debe hacerse inmediatamente ya que cualquier demora deshidrata el tejido y acelera la autolisis.
DESHIDRATACION
Su principal función es la extracción de agua del tejido, por estarazón se utilizan medios hidrofóbicos, como la parafina, celoidina y algunos plásticos, por que no infiltran en tejidos con agua. Una excesiva deshidratación produce un tejido duro, difícil de cortar, también produce que el agente aclarante no actué apropiadamente y se obtendrán bloques blandos, además produce la mayor cantidad de problemas en los siguientes pasos.
Se pueden utilizar diversos tipos dereactivos:
Reactivos hidrofilicos (atraen al agua del tejido extrayéndolo)
Reactivos que deshidratan por dilución repetitiva de los tejidos acuosos
ALCOHOLES
El alcohol absoluto tiene a lo más 1% o 2% de agua. Si se agregan unos ml de OH 100%, al xilol y se observa turbidez es por la presencia de agua en un porcentaje mayor al 2% lo que produce una acción inadecuada e incompleta del agenteaclarante.
Alcohol Etílico/Etanol: Es hidrofilicos y de rápida acción, la graduación produce la retracción. El uso por periodos de tiempo extendidos produce gran retracción y endurecimiento, el etanol junto con otros alcoholes mezclados disminuye la coloración.
Isopropanol: La eosina es insoluble en este alcohol, no sirve para la inclusión en celoidina, endurece y retrae poco, se utiliza principalmenteen procesos para plantas y animales.
ACETONA
Actúa rápido, produce excesiva retracción y es muy inflamable.
SOLVENTES UNIVERSALES
Deshidratan y aclaran al mismo tiempo (Dioxano, Butanol terciario, Tetrahidrofurano).
Dioxano: Produce menos retracción durante la deshidratación, actúa mas rápido que el etanol, se debe usar en grandes cantidades de volumen, en exposición larga no produce grandescambios indeseables.
Butanol Terciario: Se usa en proporción 50/50 con la parafina en la primera infiltración
Tetrahidrofurano: Es miscible con todo, actua rápido sin causar fuerte retracción y endurecimiento.
ACLARAMIENTO
Los reactivos usados tienen un alto índice de refracción y pone al tejido claro o transparente, es miscible en agentes deshidratantes y medios de infiltración. El uso de agentesaclarantes durante largos periodos produce endurecimiento, una aclaración excesiva produce desnaturalización de proteínas dificultando la microtomia.
Xileno: Acción más o menos rápida, produce aclaramiento del tejido, su adecuada acción determina en la infiltración, si el xileno tiene apariencia transparente es causa de exceso de agua.
Tolueno: Produce poco endurecimiento y posee tolerancia al...