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Revista Cubana de Medicina Tropical
versión On-line ISSN 1561-3054Rev Cubana Med Trop v.50 n.3 Ciudad de la Habana sep.-dic. 1998
 
Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí"
Aplicación de la técnica de reacción en cadena de la polimerasa para la detección de secuencias de Papillomavirus humano
Lic. Yudira Soto,1 Lic. Mayra Muné,2 Dra. Adibel Goicolea,3 Dra. Estrella Morales,3 Lic. Jean Michell Santoyo,4 Lic. Odalys Valdés,5 Lic. Rosa Ramírez5 y Téc.Tamara Pimentel6
Resumen
Se aplicó la técnica de reacción en cadena de la polimerasa para la detección de secuencias de Papillomavirus humano (PVH) mediante controles de líneas celulares de cáncer cervical y tejidos obtenidos por biopsia con diagnóstico clínico positivo a PVH. Se utilizó un juego de oligonucleótidos consenso, que son complementarios a una región altamente conservada dentro delmarco de lectura abierta E1 del genoma viral de los PVH que afectan la mucosa cervical. Con este juego de cebadores fue posible amplificar secuencias de ácido desoxirribonucleico (ADN) correspondientes a los PVH 6 y 11, considerados dentro del grupo de bajo riesgo y de los PVH 16, 18, 31 y 33 comprendidos en el grupo de alto riego. El estudio de la sensibilidad de la técnica de amplificación arrojócomo resultado un nivel de detección de 3,5 partículas virales por cada genoma diploide celular.
Descriptores DeCS: PAPILLOMAVIRUS HUMANO/genética; REACCION EN CADENA POR POLIMERASA/métodos; ANALISIS DE SECUENCIA DE ADN/métodos; GENOMA VIRAL; ADN VIRAL/genética.
La familia Papovaviridae está constituida por un grupo heterogéneo de virus. Hasta el presente han sido identificados 77 genotiposdiferentes de Papillomavirus en humanos. En la actualidad se ha podido determinar de forma parcial la secuencia de aproximadamente 30 tipos adicionales de Papillomavirus humanos (PVH), lo cual sugiere la existencia de un número total de 100 genotipos de PVH. De los 77 tipos cuyas secuencias han sido estudiadas por completo, más de 40 infectan la mucosa cervical y representan un grupo importante depatógenos que producen enfermedades de origen epitelial.1 La infección por PVH tiene una alta incidencia y demostrada asociación con el cáncer cervical.2 Una de las más fuertes evidencias de la función que desempeña este virus en la carcinogénesis lo constituye la presencia del ADN viral en más del 90 % de los carcinomas celulares escamosos del tracto genital.3,4 Se reconoce la vía sexual como lamás común de diseminación del virus.5
La infección del cuello uterino por PVH puede ser asintomática o provocar una serie de manifestaciones que varían desde la presencia de condilomas benignos hasta la ocurrencia de alteraciones displásicas de diferentes grados y cáncer. La distinción de los diferentes estadios patológicos tiene un alto valor pronóstico ya que mientras los condilomas casi siemprepermanecen como lesiones benignas, las neoplasias intraepiteliales cervicales (NIC) tienen una alta potencialidad de progresar al cáncer invasivo.6
Debido a la falta de un sistema celular susceptible para el aislamiento e identificación del virus y a la ausencia de pruebas serológicas adecuadas, el diagnóstico de la infección por PVH ha estado basado fundamentalmente en la detección del ácidonucleico viral.7
Desde la introducción de la reacción en cadena de la polimerasa (RCP) como nueva técnica para el diagnóstico, el estudio y análisis del ADN sufrió un vuelco tanto al nivel clínico como al investigativo. El método involucra la amplificación selectiva de secuencias específicas de ácidos nucleicos mediante síntesis enzimática, y constituye hasta el momento la técnica más sensible...