BIOLOGÍA CELULAR

Universidad Nacional del Santa
Facultad de Ciencias
Escuela Medicina Humana










Práctica de laboratorio N°04
Docente: Dr. Manuel Quispe Villanueva
Materia: Biología Molecular y Celular
Nombres:
Calderón Moscoso Anggy Carla
Cruz Flores Juan Carlos
Villanueva de la Cruz Jean Pierre
BenavidesRosales Roberto
Grupo:
“C “






PRÁCTICA N° 04

DETERMINACIÓN DE AZUCARES REDUCTORES EN LA ORINA



I. INTRODUCCIÓN


Los carbohidratos son moléculas formadas por carbono, hidrogeno y oxígeno. Todos los carbohidratos son azucares pequeños, solubles en agua (glucosa y fructosa, porejemplo) o bien cadenas, como el almidón y la celulosa, que se elaboran enlazados subunidades de azúcar.
En la naturaleza, los carbohidratos se presentan como monosacáridos (azucares simples), oligosacáridos (contienen de dos a diez unidades monosacáridos) y polisacáridos (glúcidos poliméricos más grandes).Los monosacáridos se clasifican en aldosas si tienen grupo aldehído y cetosas si tienen un grupocetona. Todos los monosacáridos, aldosas o cetosas y la mayoría de los disacáridos son azucares reductores (excepto la sacarosa) porque uno de sus dos carbonos anoméricos no está formando enlace glucosídico
Las pruebas de Fehling, por ejemplo, se basan en la capacidad de los azucares reductores de reducir los iones cúpricos (Cu2+) y aportan un ensayo sencillo para reconocer azucares que puedenexistir como aldehído o cetona libre. Los azucares que reaccionan se llaman azucares reductores, que pueden unirse de forma inespecífica a otras moléculas; los que no lo hacen, azucares no reductores
El método DNS es una técnicacolorimétrica que emplea 3,5-ácidodinitrosalicílico para la hidrólisis de polisacáridos presentes en una muestra, seguido de la determinación espectrofotométrica a 540nm delos azúcares reductores.
Esta técnica sirve para cuantificar los azucares reductores producidos durante una fermentación o para cuantificar los productos de una reacción enzimática .Por lo tanto, se aplicará esta técnica para la construcción de una curva patrón de glucosa que será una referencia para próximos experimentos








II. OBJETIVO

2.1. Demostrar e Interpretar lapresencie de Glucosa en Orina mediante la reacción de Fehling.

III. MATERIALES

3.1. Material Biológico

Muestras de glúcidos: glucosa, maItosa, lactosa, sacarosa y almidón.








Orina de una persona enferma de Diabetes.











3.2. Material de laboratorio

Tubos de ensayo





Pipetas serológica de 5 ml en 1/10






Gradillas


Vaso deprecipitación







Mechero








Reactivo de Fehling A y Fehling B






Solución de lugol






Agua hervida
















IV. PROCEDIMIENTO

4.1. PRINCIPALES REACCIONES

A. Investigación de azucares reductores. Reacción de Fehling

Fundamento

Se basa en el carácter reductor de los monosacáridos y de la mayoría de los disacáridos(excepto la sacarosa). Si el glúcido que se investiga es reductor, se oxidará dando lugar a la reducción del sulfato de cobre (II), de color azul, a óxido de cobre (I), de color rojo – anaranjado.

Procedimiento

En cada tubo de ensayo, según el número de muestras a emplear, añadir 1 cc. de Fehling A y 1 cc. de Fehling B. El líquido del tubo de ensayo adquirirá un fuerte color azul.
Agregar 1 mlde cada muestra de carbohidratos al 1% (glucosa, maltosa, lactosa, sacarosa y almidón) en los tubos de ensayo.
Calentar el tubo al baño María o directamente en un mechero de Laboratorio.
La reacción será positiva si la muestra se vuelve de color rojo-ladrillo.
La reacción será negativa si la muestra queda azul, o cambia a un tono azul-verdoso.

B. Reacción el Lugol

Fundamento

La...