Bioquimica

ACTIVIDAD ENZIMÁTICA


Integrantes:

• Acuña Diaz, Ingrid

• Aponte Sanchez, Shobert

• Maita Salazar, Verónica

• Riveros Huaranca, Yajhaira

• Trejo Moreno, Esteban

• Vigil Varela, Liseth




I. MUESTRAS:

• Hígado
• Papa
• Carne

II. MÉTODO OPERATORIO:

• Realizar un macerado de las muestras con ayuda del mortero y pilóncon una adecuada cantidad de agua destilada.
• Realizar la trituracion por espacio de 5 minutos, luego dejar en reposo entre 5 – 10 minutos.

1) Preparación del extracto:

➢ A cada uno de los tres tubos de ensayo agregar lo siguiente: 5ml de extracto respectivo obtenido (hígado, papa, carne) .
➢ A todos los tubos se le añade 2ml de H2O2 y observar la intensidad de reacción enel momento a temperatura ambiente.
➢ Las características observadas me confirman la actividad de la catalasa o peroxidasa sobre el H2O2.

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HIGADO PAPA CARNE

➢ El hígado es el que reacciona, sale espuma como indicador muy velozmente.

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2) PH: (Hígado)


➢ Preparamostres tubos de ensayo con 5 ml de estracto de higado.
➢ TUBO 1: agregamos 1 ml de HCl (10%).
➢ TUBO 2: agregamos 1 ml de agua destilada.
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➢ TUBO 3: agregamos 1 ml de NaOH (10%).
➢ Luego homogenizamos cada tubo.
➢ Se agregó 2 ml de H2O2 a cada uno de los tubos de ensayo.
➢ Posteriormente observamos la intensidad.

← Solamente hubo reacción en eltubo 2,ya que el H2O2 actúa solamente en un PH neutro.


3) Efecto de la temperatura:

➢ Prepare 4 tubos de ensayo con 5ml del extracto de hígado, que es donde la reacción fue más intensa.

➢ Tratar por espacio de 7 minutos cada uno de los tubos de ensayo a la temperatura que le corresponda a 30, 50, 70 y 90 °C.

➢ Luego a cada tubo manteniéndole la temperatura respectiva seagrega 2ml de H2O2 .


➢ Observar la intensidad de reacción.


← CONCLUSIONES:


❖ Temperatura de 40°C: reacciona muy rápido (alcanza su temperatura óptima)


❖ Temperatura de 60°C: reacciona lento pero ya no debería reaccionar (sale espuma)


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❖ Temperatura de 80°C: no reacciona

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III. CUESTIONARIO:

1. Defina y cite un ejemplo decada caso. Enzima, coenzima, holoenzima, sustrato, cofactor.

Enzima: En bioquímica, se llaman enzimas a las sustancias de naturaleza proteica que catalizan reacciones químicas, siempre que sea termodinámicamente posible (si bien no pueden hacer que el proceso sea más termodinámicamente favorable). En estas reacciones, las enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos, las cuales seconvierten en diferentes moléculas, los productos.

Coenzima: Los coenzimas son cofactores orgánicos no proteicos, que unidos a una apoenzima constituyen la holoenzima o forma catalíticamente activa de la enzima.

A diferencia de las enzimas, las coenzimas se modifican y consumen durante la reacción química; por ejemplo, el NAD+ se reduce a NADH cuando acepta dos electrones (y un protón) y portanto se agota; cuando el NADH libera sus electrones se recupera el NAD+, que de nuevo puede actuar como coenzima.

Holoenzima: Una holoenzima es una enzima que está formada por una proteína (apoenzima) y un cofactor, que puede ser un ion o una molécula orgánica compleja unida a un grupo prostético o a una coenzima. En resumidas cuentas, es una enzima completa y catalíticamente activa.Sustrato: Es una molécula sobre la que actúa una enzima.

Las enzimas catalizan reacciones químicas que involucran al sustrato o los sustratos. El sustrato se une al sitio activo de la enzima, y se forma un complejo enzima-sustrato. El sustrato por acción de la enzima es transformado en producto y es liberado del sitio activo, quedando libre para recibir otro sustrato.

La ecuación general es la...