columnas cromatografics de gases y liquidos
La cromatografía de gases es una de las técnicas más versátiles y usadas en los
laboratorios, se usa mucho en la determinación de compuestos orgánicos.
Con esta técnica se pueden separar mezclas muy complejas, cuando se acopla
con la espectrometría de masas como sistema de detección, es posible la
identificación virtualmente positiva de los eluados con una muy altasensibilidad,
creando un sistema analítico muy poderoso.
TIPOS DE CROMATOGRAFIA
CROMATOGRAFIA DE GAS-SOLIDO (de absorción)
CROMATOGRAFIA DE GAS-LIQUIDO (de partición)
La cromatografía de gas-liquido, la más importante (GLC, gas-liquid
chromatography) usada en forma de una columna capilar.
En la cromatografía de gases la muestra pasa del estado en el que se encuentra
al de vapor, engeneral la fase estacionaria es un líquido no volátil soportado en
una pared capilar con partículas solidas inertes como de tierra de diatomeas
(kieselguhr, formado por restos de esqueletos de algas unicelulares marinas
microscópicas, constituidas principalmente por sílice). El gas acarreador pasa por
la sección de referencia antes de entrar a la columna y sale de la columna por la
secciónde muestreo. La respuesta de la sección de muestreo en relación con la
señal en la sección de referencia se alimenta a un registrador donde se grafican
los máximos cromatograficos en función del tiempo.
TIPOS DE COLUMNAS
COLUMNAS EMPACADAS
Las columnas bien empacadas miden en general 10m de longitud y de 0.2 a 0.6
cm de diámetro. Las columnas empacadas pueden tener 1000 platos/m, por lo queuna columna normal de 3 m tendría 3000 platos. Las columnas cortas pueden ser
de vidrio, pero las más largas se hacen de acero inoxidable, por lo que se les
puede enderezar para llenarlas y empacarlas. También se hacen de teflón.
Las columnas empacadas se pueden usar con tamaños de muestra grandes y
conviene usarlas.
COLUMNAS CAPILARES
El trabajo de Golay condujo al desarrollo de diversascolumnas tubulares abiertas
que hoy proporcionan resoluciones extremadamente altas y se han vuelto pilares
de los analitos o análisis por cromatografía de gases.
Al aumentar el espesor de la película, aumenta la capacidad, pero también la
altura del plato y el tiempo de retención.
TUBULARES ABIERTOS CON PARED RECUBIERTA
Tiene una delgada capa liquida que recubre a las paredes del capilar ylas
soporta.
El recubrimiento se efectúa haciendo pasar lentamente una solución diluida de la
fase liquida a través de las columnas.
TUBULARES ABIERTOS RECUBIERTOS CON SOPORTE
Micro partículas sólidas recubiertas con la fase estacionaria (de manera similar a
lo que ocurre con las columnas empacadas) se adhieren a las paredes del capilar;
con ello se consigue mayor área y mayor capacidad quela pared recubierta.
El factor más importante en la cromatografía de gases es la selección de la
columna adecuada (fase estacionaria) para la separación particular sobre la que
se desea experimentar. La naturaleza de la fase liquida o solido determinara el
equilibrio de intercambio con los componentes de la polaridad de la muestra que a
su vez dependerá de la solubilidad o absorción de lamuestra.
Los gases se pueden inyectar con una jeringa hermética de los gases o a través
de una cámara especial para la admisión de gases de volumen constante (valvula
de muestreo de gases).
Para columnas capilares solo se deben inyectar volúmenes de aproximadamente
1/100 debido a la menor capacidad.
La muestra se detecta automáticamente cuando sale de la columna (es un flujo
constante)mediante diversos detectores cuya respuesta depende de la
composición del vapor. En general el detector tiene una sección de referencia y
una sección de muestreo.
TUBULARES ABIERTAS DE CAPA POROSA
Tiene partículas de fase solida adheridas a la pared de la columna para
cromatografía de adsorción, se suelen usar partículas de alumina o de polímeros
porosos (mallas moleculares).
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