Cromatografía

Cromatografía líquida de alta eficacia
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La Cromatografía líquida de alta eficacia o High performance liquid chromatography (HPLC) es un tipo de cromatografía en columna utilizada frecuentemente en bioquímica y química analítica. También se la denomina a veces Cromatografía líquida de alta presión o High pressure liquidchromatography (HPLC), aunque esta terminología se considera antigua y está en desuso. El HPLC es una técnica utilizada para separar los componentes de una mezcla basándose en diferentes tipos de interacciones químicas entre las sustancias analizadas y la columna cromatográfica.
|Contenido |
|[ocultar]|
|1 Principal |
|2 Tipos de HPLC |
|2.1 Cromatografía de fase normal |
|2.2 Cromatografíade fase reversa |
|2.3 Cromatografía de exclusión molecular |
|2.4 Cromatografía de intercambio iónico |
|2.5 Cromatografía basada en bioafinidad |
|3Parámetros |
|3.1 Diámetro interno |
|3.2 Medida de las partículas |
|3.3 Tamaño de poro |
|3.4Presión de la bomba |
|4 Fabricantes de aparatos de HPLC |
|5 Fabricantes de columnas de HPLC y accesorios |
|6 Véase también|
|7 Enlaces externos |

[pic][editar] Principal
En la HPLC isocrática el compuesto pasa por la columna cromatográfica a través de la fase estacionaria (normalmente, un cilindro con pequeñas partículas redondeadas con ciertas características químicas en su superficie) mediante el bombeo de líquido (fase móvil) aalta presión a través de la columna. La muestra a analizar es introducida en pequeñas cantidades y sus componentes se retrasan diferencialmente dependiendo de las interacciones químicas o físicas con la fase estacionaria a medida que adelantan por la columna. El grado de retención de los componentes de la muestra depende de la naturaleza del compuesto, de la composición de la fase estacionaria y dela fase móvil. El tiempo que tarda un compuesto a ser eluido de la columna se denomina tiempo de retención y se considera una propiedad identificativa característica de un compuesto en una determinada fase móvil y estacionaria. La utilización de presión en este tipo de cromatografías incrementa la velocidad lineal de los compuestos dentro la columna y reduce así su difusión dentro de la columnamejorando la resolución de la cromatografía. Los disolventes más utilizados son el agua, el metanol y el acetonitrilo. El agua puede contener tampones, sales, o compuestos como el ácido trifluoroacético, que ayudan a la separación de los compuestos.
Una mejora introducida a la técnica de HPLC descrita es la variación en la composición de la fase móvil durante el análisis, conocida como elución...