Cromatografia

Cromatografía
Es una técnica de separación de sustancias o mezclas que se basa en las diferentes velocidades con que se mueve cada una de ellas a través de un medio poroso, arrastradas por un disolvente en movimiento, es decir un intercambio de los solutos entre dos fases cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades deestos componentes.
La cromatografía del griego chroma que significa color y graphein que significa escribir, agrupa un conjunto importante de diversos métodos que permite a los científicos separar componentes estrechamente relacionados en mezclas complejas, lo que en muchas ocasiones resulta imposible por otros medios, este es un poderoso método de separación que tiene aplicación en todas las ramasde la ciencia, fue inventada y denominada así, a principios del siglo XX por el botánico ruso Mikhail Tswett. El empleo la técnica para separar varios pigmentos vegetales, tales como clorofilas y xantofilas, haciendo pasar disoluciones de estos compuestos a través de una columna de vidrio rellena con carbonato de calcio. Las especies separadas aparecían como bandas coloreadas en la columna, loque justifica el nombre que elegido para el método.

En todas las separaciones cromatográficas la muestra se desplaza con una fase móvil, se produce una competición entre la fase móvil y la fase estacionaria por el componente, y a este proceso se le denomina partición del componente distribuido entre las dos fases. Es decir, se establece un equilibrio entre la concentración del componentepresente en la fase móvil y la concentración presente en la fase estacionaria.
La fase móvil puede ser un gas un líquido o un fluido supercrítico y su función es transportar a los componentes de la mezcla. Esta fase móvil se hace pasar a través de una fase estacionaria con la que es inmiscible y que se fija a una columna o a una superficie solida.
La fase estacionaria consiste en partículas,generalmente sólidas, pequeñas y con una superficie microporosa, de forma que presenta un amplio desarrollo superficial. Puede estar empaquetada en forma de columna o extendida en forma de capa. En ocasiones es necesario un tratamiento químico de la fase estacionaria para conseguir unas partículas de tamaño y poro adecuados.

Las dos fases se eligen de tal forma, que los componentes de la muestra sedistribuyen de modo distinto entre la fase móvil y la fase estacionaria. Aquellos componentes que son fuertemente retenidos por la fase estacionaria se mueven lentamente con el flujo de la fase móvil; por el contrario, los componentes que se unen débilmente a la fase estacionaria, se mueven con rapidez.
Como consecuencia de la distinta movilidad, los componentes de la muestra se separan en bandaso zonas discretas que pueden analizarse cualitativa y/o cuantitativamente.
Clasificación de los métodos cromatográficos.
Los métodos cromatográficas se pueden clasificar en dos métodos distintos. El primero de ellos se basa en la forma en que las fases estacionaria y móvil se ponen en contacto.
En la cromatografía plana, la disolución de la muestra a separar se sitúa sobre el plano quecontiene la fase estacionaria en forma de mancha o a veces de banda, a corta distancia de uno de los extremos de dicho plano. Una vez seca la mancha o banda, el extremo del plano próximo a la misma se pone en contacto con la fase móvil, manteniendo todo el sistema cromatográfico en una cámara cerrada. La separación se produce por la migración diferencial de los componentes de la muestra en la direcciónen que se mueve la fase móvil.
Generalmente a diferencia de la cromatografía en columna, en cromatografía plana el analito no abandona el lecho cromatográfico, de forma que el proceso se detiene cuando la fase móvil ha alcanzado una determinada zona del plano.
En la cromatografía de columna, un tubo estrecho contiene la fase estacionaria a través de la cual hace pasar la fase móvil por presión...