cromatografia

CROMATOGRAFIA
La cromatografía es una técnica de separación de sustancias químicas y permite realizar el análisis
de mezclas que pueden llegar a ser muy complejas ya sea por el número de componentes o por la
matriz de origen de los mismos o por una combinación de ambos factores.
En la cromatografía se requiere de una fase móvil que empuje las sustancias a separar a través de
una columnadonde se empaca una fase estacionaria. La separación de los componentes de la
mezcla ocurre debido a las interacciones entre los analitos y las fases empleadas.
Las fases móviles más comunes empleadas en cromatografía son los gases y los líquidos por lo que
las dos técnicas de separación más comunes empleadas en el análisis de mezclas complejas son la
cromatografía de gases y la cromatografía delíquidos.

Cromatografía de gases (CG).
En la cromatografía de gases la fase móvil es un gas de alta pureza (>99.99%) como helio o nitrógeno
que normalmente se obtienen de cilindros a alta presión. La elección de la fase móvil depende de la
aplicación siendo más común el uso de Helio.
El gas de arrastre circula a través de un sistema de inyección de la muestra, pasa a través de la
columna deseparación y de ahí al detector. Las columnas modernas con de tipo capilar que van
desde 15 hasta 100 metros de largo y tiene diámetros internos de 0.20 a 0.53 mm. Todo el proceso
cromatográfico se realiza en condiciones de temperatura elevada (hasta 300°C dependiendo de la
aplicación) para evitar la condensación de componentes de baja volatilidad. Las condiciones de
temperatura deben mantenerun compromiso entre conservar los compuestos en fase gaseosa y
evitar su descomposición térmica debido a temperatura muy elevada.
La cromatografía de gases requiere que la muestra a analizar se encuentre en fase gaseosa o que se
pueda evaporar fácilmente mediante la aplicación de calor sin sufrir degradación y que este libre de
humedad. En caso de que la muestra no cumpla con este requisitono puede ser analizada mediante
esta técnica a menos que se transforme por derivatización en un compuesto volátil. La
derivatización implica tiempo y costo adicional debido al empleo de los agentes derivatizantes así
como un cierto riesgo de menor precisión en el análisis debido a la adición de pasos de
procesamiento de muestras.
Debido a que sustancias de diferente naturaleza pueden requerircondiciones cromatográficas
diferentes es común en CG que estas se deban clasificar en grupos para realizar análisis separados
para cada grupo.
La escases de helio ha obligado a los usuarios de esta técnica a explorar el empleo de hidrógeno
como gas de arrastre pero su uso presenta algunos inconvenientes, entre ellos su alta explosividad.
Adicionalmente en los casos en que el detector es decombustión o de espectrometría de masas, su
uso no es posible.
Debido a lo anterior la cromatografía de gases está limitada a un cierto número de compuestos que
cumplan con los requisitos de volatilidad y estabilidad térmica adecuada para no descomponerse
durante el proceso de análisis. Sin embargo ha sido una técnica muy empleada y con gran aceptación
entre los químicos analíticos que handesarrollado una serie de técnicas para superar los
inconvenientes mencionados.

Cromatografía de líquidos (CL).
La cromatografía de líquidos emplea como fase móvil una mezcla de líquidos siendo las más
comunes agua-acetonitrilo y agua-metanol añadiendo una pequeña cantidad de ácido orgánico. La
fase móvil se hace pasar a través de la columna que contiene la fase estacionaria, que en este casoes un tubo de acero de entre 5 y 30 cm de largo y 2.1 a 4.6 mm de diámetro interno mediante una
bomba de alta presión. A diferencia de la cromatografía de gases es suficiente con que las muestras
a analizar se encuentren en estado líquido o se puedan disolver. Esto hace que su alcance se
extienda a un número de compuestos mucho mayor que la CG y que la preparación de las muestras
sea...