Espectrofotometria
tría
Que es un espectro:
Un espectro esta formado por una gamma de
colores y se divide en tres zonas diferentes:
• Zona ultra violeta(U.V)con longitud de onda de
400 milimicrones
•Zona visible (VIS) entre 400-700 milimicrones
• Zona infrarroja (IR) encima de 700
milimicrones
Fotómetro:
Es un instrumento para medir la intensidad de
la luz.
Espectrofotómetro:
Elespectrofotómetro constituye una herramienta
fundamental en el laboratorio clínico. Más del 90%
de las determinaciones que se realizan en Química
Clínica tienen como paso final la lectura de una
absorbancia o unatransmitancia.
La espectroscopía UV-Vis está basada en el proceso de
absorción de la radiación ultravioleta-visible (radiación con
longitud de onda comprendida entre los 400 y 700 nm) por
unamolécula. La absorción de esta radiación causa la
promoción de un electrón a un estado excitado. Los electrones
que se excitan al absorber radiación de esta frecuencia son los
electrones de enlace de lasmoléculas, por lo que los picos de
absorción se pueden correlacionar con los distintos tipos de
enlace presentes en el compuesto.
Aplicaciones :
Determinación de grupos funcionales enmoléculas
orgánicas
Análisis de muestras bioquímicas
Determinación de metales en compuestos de coordinación
Análisis de semiconductores
Medidas de color
Determinación cuantitativa
Seguimiento de la cinéticade procesos químicos y
bioquímicos
Partes fundamentales del
espectrofotómetro
Componentes externos
Terminologías utilizadas en
espectrofotometría
Ley de Lambert beer:
´´En condicionesadecuadas la cantidad de luz absorbida por
una solución coloreada, cuando se ilumina con luz de longitud
de onda conveniente es directamente proporcional a la
concentración del componente coloreado.´´
A =εdc
Donde:
A=
Absorbencia
ε=
Coeficiente molar de extinción
d=
Distancia en cm
c=
Concentración molar
Absorción:
Es propiedad que tienen las sustancia de absorbe radiaciones
electromagnéticas de...
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