estudiante

6. Fundamento de la tinción de Gram.

La tinción de Gram es una tinción diferencial que permite distinguir bacterias Gram positivas de Gram negativas, que es posible gracias a la naturaleza físicade sus paredes celulares. El peptidoglicano no se tiñe propiamente, más bien actúa como una barrera de permeabilidad para evitar la pérdida de cristal de violeta. Durante el proceso las bacterias stiñen primero con cristal y luego se trata con yoduro (lugol) para favorecer la retención del colorante. Cuando a continuación se decolaran las bacterias Gram positivas con etanol acetona, se cree queel alcohol contrae los poros de la gruesa capa de peptidoglicano. En consecuencia, el complejo colorante-iodo no es eliminado durante la fase de decoloración y las bacterias Gram positivascontinuaran de color azul. Por el contrario la capa de peptidoglicano de las bacterias Gram negativas es muy fina, sin tantos enlaces y con poros de mayor tamaño, además, también es posible que el tratamientocon alcohol extraiga suficientes lípidos de la envoltura de las células Gram negativas, como para aumentar su porosidad. Por estos motivos, el alcohol elimina más fácilmente el complejo cristalvioleta-yodo de las bacterias Gram negativas.
La tinción de Gram es un método que no tiñe igualmente todas las células, un proceso denominado tinción diferencial. La tinción de este tipo más extensamenteutilizada es la tinción de Gram, denominada así por el bacteriólogo danés Hans Christian Gram, quien la desarrollo. Sobre la base de su reacción a la tinción de Gram, las bacterias pueden dividirse endos grupos, Gram positivas y Gram negativas. Debido a su importancia en taxonomía bacteriana y a que indica diferencias fundamentales de la pared celular de las distintas bacterias, describiremosaquí con cierto detalle la tinción de Gram. Las células fijadas al calor sobre un portaobjetos se tiñen primero con una solución de cristal violeta (otros colorantes básicos no son tan efectivos) y son...