Fisiologia
Paula parra, Andrés acosta, Gilberto consuegra, Jorge Barahona, Jamith maestre
RESUMEN
La espectrofotometría es el método de análisis óptico más usado en las investigaciones químicas y bioquímicas. El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación absorbida o transmitida poruna solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.
La experiencia reproducida en la universidad del magdalena Colombia, permitió la aplicación de distintas absorbancia de las sustancias para calcular su concentración en una solución, aunque también se varió la concentración y la longitud de onda proyectada para averiguar ladiferencia entre la concentración y la frecuencia de una onda de luz
ABSTRACT
The spectrophotometric analysis is the method most used optical chemical and biochemical investigations. The spectrophotometer is an instrument for comparing the radiation absorbed or transmitted by a solution containing an unknown quantity of solute, and one containing a known amount of the same substance.Experience played at the University of Magdalena Colombia, allowed the application of different substances absorbance to calculate its concentration in a solution, although the concentration was varied and the wavelength projected to find the difference between concentration and frequency of one light wave
INTRODUCCIÓN.
La espectroscopia UV-Visible estudia el fenómeno de adsorción de la radiación UVVisible de moléculas orgánicas e inorgánicas.
La región visible, a la que es sensible el ojo humano, se localiza entre los 380 y 780 nm.
U.V lejano → U.V cercano → Visible
0.6 – 190 nm 190 – 380 nm 380 – 780 nm
La absorción de la radiación ultravioleta o visible por moléculas orgánicas einorgánicas,
Generalmente se produce por la excitación de los electrones de enlace, por lo tanto, la longitud de onda de los máximos de absorción se puede relacionar con los enlaces de las especies
Absorbentes.
Los métodos espectroscópicos se basan en la capacidad de las sustancias de absorber
(O emitir) radiación electromagnética. Éstos se pueden emplear para determinar la
Concentración deun reactivo o producto durante una reacción.
La figura 1 muestra los componentes básicos de un espectrofotómetro.
El aparato detecta la cantidad de luz transmitida o absorbida a través de la solución en
La celda y la compara con la que se transmite o absorbe a través de una solución de referencia
Denominada “blanco”. La lectura en la escala ya está convertida en absorbancia.
Latransmitancia de la muestra se define como la relación de la radiación transmitida y la
Incidente (T= I/ I0). La disminución de la intensidad de la radiación depende de la concentración
Del absorbente y de la longitud del camino recorrido por el haz. Estas relaciones se recogen en
La Ley de Lambert-Beer-Bourger:
A = -log T
A = log (I / I0) = (ε×b) ×c
ABSORBANCIA = (ε × b) × c
Queestablece una relación lineal entre la absorbancia y la concentración, donde:
ε.- es la constante de proporcionalidad llamada coeficiente de absorción molar,
Absortividad molar o coeficiente de extinción (M-1 cm-1). Es la característica de una
Sustancia que nos dice cuánta luz absorbe a una longitud de onda determinada.
b.- es el paso óptico, anchura de la celda quecontiene la muestra (cm).
c.- es la concentración de la especie de la cual estamos midiendo la absorbancia (M).
La ecuación mencionada es el fundamento de la espectrofotometría. La ley de Lambert Beer Bourger se cumple para una radiación monocromática que atraviesa una disolución diluida
(≤ 0.01M), cuando la especie absorbente no participa en un equilibrio que dependa de su
Concentración....
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