Fundamentos Y Principios De Operacion De Microscopía

FUNDAMENTOS Y PRINCIPIOS DE OPERACIÓN DE MICROSCOPÍA ÓPTICA
DEFINICIÓN
El microscopio es un instrumento que amplifica la imagen de un objeto pequeño mediante un sistema de lentes y fuentes de iluminación. Los microscopios pueden aumentar de cientos a cientos de miles de veces el tamaño original.
En el microscopio óptico el aumento del objeto se consigue usando un sistema de lentes quemanipula el paso de los rayos de luz entre el objeto y los ojos. La lente convexa constituye un microscopio simple, pero generalmente no logra aumentos mayores a 10 veces el tamaño real del objeto. Para obtener magnificaciones mayores se desarrolló el microscopio compuesto, el cual está constituido por un sistema de lentes que logran magnificaciones de más de 1000 veces el tamaño real del objeto.PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO
El microscopio compuesto consta de dos sistemas de lentes uno ocular y uno objetivo, además de todo el sistema mecánico encargado de darle soporte.
• Dentro de los componentes no ópticos se encuentran la base, el pie y el brazo los cuales en conjunto se denominan estativo.
• En la base del microscopio se encuentra la fuente de luz o el espejo responsable dedirigir la luz natural a la muestra.
• La platina constituye un soporte sobre el cuál se coloca el espécimen y posee un orificio que permite el paso de la luz, además tiene dos tornillos que permiten el desplazamiento en el plano xy del espécimen.
• En ambos lados del estativo se disponen, muchas veces, de forma concéntrica los tornillos de enfoque del microscopio (macrométrico ymicrométrico) encargados de mover hacia arriba y hacia abajo la platina para enfocar el espécimen.
• Encima de la platina se coloca el revólver portaobjetivo donde se encuentran las lentes objetivas de distinto aumento, la rotación del revólver coloca a cada una de las lentes en el eje óptico.
• Siguiendo el camino del eje óptico hacia arriba se encuentra el tubo donde se localizan los elementos delsistema óptico. La parte óptica propiamente dicha esta formada por el condensador, la lente objetiva y la ocular.
• El condensador es una lente convergente que toma los rayos de luz provenientes de la fuente y forma un cono de rayos convergentes sobre la muestra, posee un tornillo de enfoque que permite su movimiento hacia arriba y abajo para lograr un óptima iluminación del espécimen, además, poseeun diafragma que regula la cantidad de luz que llega al espécimen, así como el ángulo del cono de luz.
• La lente objetiva es un conjunto de lentes, de los cuáles el más frontal es el encargado de magnificar la imagen del objeto, el resto de los lentes se encargan de corregir aberraciones ópticas. Las aberraciones (distorsiones) esféricas y cromáticas son parte inherente de toda lente. Lasaberraciones esféricas hacen que el campo se vea curvo cuando en realidad es plano, las cromáticas son producto de los diferentes índices de refracción de las diferentes longitudes de onda que componen la luz blanca y hacen que los objetos se vean borrosos.

Figura 1. a) tipos de lentes utilizadas en el microscopio óptico compuesto, b) nomenclatura de las características específicas de la lenteobjetiva.
• La iluminación debe ser brillante y uniforme en toda la muestra, en los microscopios actuales se utiliza el sistema de iluminación Köhler, en el que una lente colectora que se coloca por delante de la fuente generadora de luz proyecta una imagen aumentada de la fuente de luz, su foco se coloca exactamente en el diafragma del condensador.
El límite de resolución se define como la menordistancia que tienen que tener dos puntos para ser distinguidos como dos entidades independientes. Para el ojo humano esta distancia es de 100μm. El poder de resolución de un microscopio aumenta cuando la mínima distancia entre los dos puntos disminuye, por lo que se puede utilizar aceite entre la muestra y la lente objetiva para que los rayos de luz que atraviesan la muestra se desvíen un...