Identificacion Y Marcha Analitica De Carbohidratos

Tema: Identificación y Marcha Analítica de Carbohidratos

* Introducción
Reaccion de Anthrone
La Antrona forma un compuesto verde en medio ácido fuerte (Acido sulfúrico) con ciertos carbohidratos y sacáridos, en especial con azúcares y almidones. La reacción de la Antrona (9.10 dihydro 9 ketoantraceno) en medio sulfúrico produce un derivado del furano que tiene su máximo de absorciónen 620 nm.
La mayoría de los carbohidratos dan la reacción de la antrona/sulfúrico en alguna medida pero en las condiciones descriptas la reacción es razonablemente específica para hexosas. Todos los polisacáridos reaccionan en medio ácido fuerte y la contaminación con celulosa o fibras debe ser rigurosamente evitada. La variación en el blanco puede ser muy molesta; es necesario recristalizar laantrona para obtener blancos bajos y aceptables. Como en todas las reacciones de condensación las condiciones de calentamiento y enfriamiento deben estar muy bien estandarizadas y todos los tubos de una serie deben tratarse simultáneamente en las etapas de calentamiento y enfriamiento.

Test De Benedict

En química, la reacción o prueba de Benedict identifica azúcares reductores (aquellos quetienen su OH anomérico libre), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, ycelobiosa. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita de la solución alcalina como Cu2O de color rojo-naranja.
El reactivo de Benedict consta de:
Sulfato cúprico;
Citrato de sodio;
Carbonato Anhidro de Sodio.
Además se emplea NaOH para alcalinizar el medio.
El fundamento deesta reacción radica en que en un medio alcalino, el ion cúprico (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O).
El medio alcalino facilita que el azúcar esté de forma lineal, puesto que el azúcar en solución forma unanillo de piranósico o furanósico. Una vez que el azúcar está lineal, su grupo aldehído puede reaccionar con el ion cúprico en solución.
En estos ensayos es posible observar que la fructosa (una cetohexosa) es capaz de dar positivo. Esto ocurre por las condiciones en que se realiza la prueba: en un medio alcalino caliente esta cetohexosa se tautomeriza (pasando por un intermediario enólico)a glucosa (que es capaz de reducir al ion cúprico).
Los disacáridos como la sacarosa (enlace α(1 → 2)O) y la trehalosa (enlace α(1→1)O), no dan positivo puesto que sus OH anoméricos están siendo utilizados en el enlace glucosídico.
En resumen, se habla de azúcares reductores cuando tienen su OH anomérico libre, y éstos son los que dan positivo en la prueba de Benedict.

Test De Seliwanoff

La prueba deSeliwanoff es una prueba química que se usa para distinguir entre aldosas y cetosas. Los azucares son distinguidos a traves de su función como cetona oaldehído. Si el azúcar contiene un grupo cetona, es una cetosa, y si contienen un grupo aldehído, es una aldosa. Esta prueba esta basada en el hecho de que, al calentarlas, las cetosas son deshidratadas más rápido que las aldosas.
El reactivoconsiste en resorcinol y ácido clorhídrico concentrado:
La hidrólisis ácida de polisacáridos y oligosacáridos da azucares simples
Entonces la cetosa deshidratada reacciona con el resorcinol para producir un color rojo. Es posible que las aldosas reaccionen produciendo un leve color rosa.
La fructosa da positiva a esta prueba. La sacarosa da negativa a esta prueba ya que la molecula, si bien estaconstituida por glucosa y fructosa, en la union alfa (1-2) se anulan las propiedades reductoras de la glucosa y la fructosa, por lo que no da positiva, la sacarosa da positiva cuando se le realiza una hidrolisis ácida, lo que la convierte en un azucar invertido o invertasa, donde se rompe el enlace alfa (1-2) y permite que la reaccion con esta prueba dé positivo.

* Objetivo

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