INFORME1 MICROBIOLOGIA Final

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS
BIOQUIMICA CLINICA
LABORATORIO DE MICROBILOGÍA CLÍNICA

Laboratorio 50%
/10
Informe 50%
/10
Total
/20

1. RESUMEN:
Las tinciones en microbiología son las primeras herramientas que se utilizan en el laboratorio para el diagnóstico de las enfermedades infecciosas. Desde hace muchos años han ayudado a resolver problemas de origenmicrobiano. Hay una gran variedad de tinciones, que se han ido desarrollando para la detección de los diferentes agentes infecciosos en los que se incluyen bacterias, parásitos y hongos. La tinción de Gram se considera básica en la valoración inicial de muestras para análisis bacteriológico.
2. Introducción
Las bacterias vivas, en suspensión acuosa tienen propiedades ópticas similares a las delagua y, por lo tanto, son difíciles de observar con el microscopio de campo claro debido a la falta de contraste con el medio que las rodea. Este contraste aumenta cuando se tiñen las bacterias, con lo que se hacen más visibles. Sin embargo, para muchos fines es preferible evitar la coloración debido a que frecuentemente altera y mata a las células. (Donoso, 2014)
La coloración de lasbacterias tiene como fines:
1. Aumentar el contraste de las células con el medio que las rodea. Esto implica mejorar la visualización de las bacterias y permitir la distinción de formas y tamaño.
2. Diferenciar grupos bacterianos por su reacción frente a determinados colorantes.
3. Revelar la presencia de distintas estructuras internas.
Existen diferentes tipos de coloraciones que se emplean enel Laboratorio de microbiología y son:
Coloración simple.- Se utiliza un solo colorante que puede ser de básico. Al igual que la tinción negativa, sólo nos permite observar la forma, el tamaño y el tipo de agrupación de las células Una vez fijada una preparación, puede emplearse para teñir las células los siguientes colorantes básicos: azul de metileno, cristal violeta o fucsina fenicada. Estospresentan diferente afinidad por las bacterias y por ello los tiempos de aplicación serán distintos.
Coloración diferencial.- Intervienen dos o más colorantes y cada uno diferencia una estructura. El colorante que se usa en segundo lugar es de color diferente al del primero, denominándose colorante de contraste.
Coloración Gram.- La tinción de Gram es uno de los métodos de tinción másimportantes en el laboratorio bacteriológico y con el que el estudiante debe estar perfectamente familiarizado. Su utilidad práctica es indiscutible y en el trabajo microscópico de rutina del Laboratorio de Microbiología las referencias a la morfología celular bacteriana (cocos, bacilos, positivos, negativos, etc) se basan justamente en la tinción de GRAM.
Descrita en forma breve, la secuencia de latinción es la siguiente: el Frotis fijado con calor se tiñe 1 min con Violeta Cristal, se lava con agua, se cubre con solución Yodada durante 1 min y se lava de nuevo con agua, decolorar con mezcla alcohol etílico acetona. Escurrir y cubrir con Safranina (color de contraste) durante 30 seg. Lavar y secar. (UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA NACIONAL, 2009)
Las bacterias gram-positivas y gram.-negativas tiñende forma distinta debido a las diferencias constitutivas en la estructura de sus paredes celulares. La pared de la célula bacteriana sirve para dar su tamaño y forma al organismo así como para prevenir la lisis osmótica. El material de la pared celular bacteriana que confiere rigidez es el peptidoglicano. La pared de la célula grampositiva es gruesa y consiste en varias capas interconectadas depeptidoglicano así como algo de ácido teicoico. Generalmente, 80%-90% de la pared de la célula gram-positiva es peptidoglicano. La pared de la célula gram-negativa, por otro lado, contiene una capa mucho más delgadaúnicamente de peptidoglicano y está rodeada por una membrana exterior compuesta de fosfolípidos, lipopolisacáridos, y lipoproteínas. Sólo 10% - 20% de la pared de la célula gramnegativa...