medicina

Practica 12: Diagnostico micologico 2 
Dra. Rosaura Caron Estrada 
Diagnostico micologico de punción de nódulos subcutáneos 
Preparación del paciente y toma de muestra: asepsia de la piel del área afectada con iodopovidona, para 
realizar la punción aspiración se debe utilizar una jeringa de 5‐10ml con aguja de 25x8, se carga la jeringa con 0.5ml de solución fisiológica estéril, se punza el nódulo por su parte media, se inyecta y se 
aspira. El material obtenido se coloca en un recipiente estéril de cierre hermético. 
Examen microscópico:‐Examen en fresco y Tinta china 
                                       ‐Coloración de Giemsa (visualización y hongos y citología) 
                                       ‐Ziel Neelsen o Kinyoun (búsqueda de Nocardia, BAAR) Cultivo e identificación:‐ 2 Tubos de agar Sabouraud     1 tubo se incuba a 28ºC 
                                          ‐2 Tubos de BHI                            1 tubo se incuba a 35‐ 37ºC 
                                        ‐2 Tubos de Lowenstein Jensen    21‐28 días (búsqueda de M.marinum/ ulcerans)                                           ‐Agar sangre o Thayer Martin  (incubación a 35‐37ºC, si se sospecha de Nocardia) 
                                          ‐Agar NNN (incubación a 22ºC 7‐10 días, si se sospecha de Leishmania) 
De acuerdo al examen microscópico y a la sospecha clínica, se elegirán los medios de cultivo apropiados 
a utilizar y se definirá el tiempo y la temperatura de incubación. 
Diagnostico micologico de biopsias y piezas quirúrgicas Para el procesamiento de este tipo de muestras en material debe ser fraccionado en 2 porciones: una 
parte colocar en tubo con solución fisiológica estéril (debe remitirse al laboratorio de microbiología lo 
antes posible, pero si no fuera posible se debe conservar a 4ºC). La otra parte se coloca en formol al 10% 
para enviar al laboratorio de anatomopatología. 
Las biopsias pueden ser de: ‐Pólipos nasales o conjuntiva                                                   ‐Micetomas 
                                                  ‐Nódulos 
                                                  ‐Mucormicosis (Zycomicosis) 
Procesamiento: cuando se sospecha de mucormicosis no se debe macerar el material porque se rompe 
el hongo y después no crece en el cultivo. Habitualmente las muestras de biopsias se homogeneízan por maceración en mortero estéril. Entonces para el resto de los agentes etiológicos, el material se coloca 
en una placa de petri estéril, se secciona con pinza y bisturí estériles, se preparan portaobjeto para 
distintas coloraciones y deja material para el cultivo. 
Examen microscópico:‐Examen en fresco y Tinta china 
                                       ‐Coloración de Giemsa (visualización y hongos y citología)                                        ‐Ziel Neelsen o Kinyoun (búsqueda de Nocardia, BAAR) 
                                       ‐Gram 
De acuerdo al examen microscópico y a la sospecha clínica, se elegirán los medios de cultivo apropiados 
a utilizar y se definirá el tiempo y la temperatura de incubación. 
Cultivo e identificación (de acuerdo al examen microscópico) 
‐Actinomicetos anaerobios: BHI en anaerobiosis o microaerobiosis (incubación 35‐37ºC) ‐Filamentos bacterianos AAR o bacterias filamentosas Gram(+) con ramificaciones (sospecha de 
Nocardia, Actinomadura o Streptomyces): Thayer Martin, Sabouraud y Agar sangre (incubación 37ºC 
durante 2 semanas como minimo) 
‐Granos de micetomas: Agar Sabouraud glucosado, Lactrimel, agar miel de Sabouraud, agar papa 
zanahoria. 
‐Hifas ramificadas gruesas no tabicadas (sospecha de Zygomicetes): BHI, Sabouraud (incubación a 28ªC y 
35ºC) 
 Los agentes etiológicos fúngicos buscados en estas muestras son:  
 
Cromomicosis: Cladophialophora carrionii, Phialophora verrucosa, Fonsecae pedrosoi 
Esporotricosis: Sporotrix shenckii ...