microscopia 2

UNIVERSIDAD ANDRÉS BELLO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR

TRABAJO PRÁCTICO N°1:

MICROSCOPIA I

2010

Introducción

La curiosidad del ser humano por observar la naturaleza a escalas diminutas, nos ha llevado a desarrollar múltiples tecnologías para dicha tarea. Galileo Galilei (1564-1642) fue el pionero en lafabricación de lo que seria conocido hasta la actualidad como “Microscopio”, instrumento que nos ha dado la facultad de analizar el mundo biológico a niveles imperceptibles para el ojo humano. Robert Hooke (1635-1703) y Anton Van Leeuwenhoek (1632-1723), fueron de igual forma, los primeros en realizar observaciones y descripciones sistemáticas a nivel microscópico, de tejidos humanos, vegetales ymicroorganismos1.

Estos avances, además de otros posteriores en el ámbito de la microscopia, permitirían que siglos después, Schleiden y Schwann, en 1838, definieran la “teoría celular”, lo que daría el paso definitivo al nacimiento de la biología celular2. Pero era necesario todavía, el desarrollo de técnicas de tinción y coloración, logradas a finales del siglo XIX, para poder hacer visiblecaracterísticas incoloras y translúcidas de los organelos celulares; posteriormente la invención del microscopio electrónico a finales de la década de 1940, abrió nuevas posibilidades, dándonos a conocer detalladamente la estructura interior de la célula.

Lo que posee en común toda esta búsqueda y avance de nuevas tecnologías en el ámbito de la microscopía, es lograr la observación mas completade los diferentes tipos celulares que existen, en su mayor nitidez posible, con el fin de poder visualizar, comprender e interpretar la actividad intracelular. Entonces, como alumnos de medicina que nos iniciamos en este ámbito de la biología, nos planteamos interrogantes como las siguientes: ¿Como se utiliza el microscopio?, ¿Como se manipulan las muestras para ser observadas?, ¿Qué tanimportantes son los métodos de tinción celular?, ¿Cuál es la potencia resolutiva de los diferentes lentes utilizados actualmente? ...

Por las razones antepuestas, este práctico de laboratorio tiene como principal objetivo comprender el uso y estructura de instrumentos ópticos de laboratorio, que en nuestro caso será el microscopio óptico, además de observar y comparar diferentes tipos de muestrascelulares3. Lo anterior hará imprescindible discutir con objetividad y el mayor respaldo bibliográfico posible, las observaciones hechas, y resultados logrados acerca de la observación de tejidos histológicos.








Materiales y Métodos


En el práctico de laboratorio, se procedió en primer lugar al reconocimiento de las diferentes piezas del microscopio óptico, en su sistema mecánico,óptico y de iluminación. De igual forma, en conjunto a la charla de la profesora, se conoció la función de cada una de estas piezas.

Las actividades propuestas utilizaron distintos métodos de y condiciones experimentales para su observación.

Actividad 1:

Consistió en registrar el poder de aumento (X) y la apertura numérica (NA) de cada lente objetivo, ocular, y la apertura numérica delcondensador.

Con el valor de apertura numérica efectiva máxima (apertura numérica del lente con mayor resolución) y una ecuación dada, se calculó y registro el “poder de resolución”, y “límite de resolución” del microcopio en uso.

Actividad 2:

Se coloco un portaobjetos con la letra “E”, predispuesto en los materiales de trabajo, en la platina del microscopio, luego de ayustar la imagen con eldesplazador de la platina se observo la muestra utilizando el lente objetivo 10X y 40X, dibujando las observaciones.

Actividad 3:

Se procedió a observar muestras previamente tratadas, de Corte de Intestino de Rattus norvegicus (Berkenhout), Tejido Hepático (hepatocitos) de Rattus norvegicus (Berkenhout) y Frotis de Sangre Humana. Los cuales fueron observados en el microscopio solo con las...