Obtenci N De Anticuerpos Monoclonales

Obtención de
anticuerpos
monoclonales

Integrantes: Jocelyn Parada
Pablo Vilunir
Carlos Sánchez
Hugo Silva
Miss: Maribel Lillo
Curso: 4°MB
Fecha:19/08/15

Definición de anticuerpos:
• Es una proteína producida por el sistema
inmunitario del cuerpo cuando detecta sustancias
dañinas, llamadas antígenos. Los ejemplos de
antígenos abarcan microorganismos (tales como
bacterias, hongos, parásitos yvirus) y químicos.
• Los anticuerpos se pueden producir cuando el
sistema inmunitario erróneamente considera el
tejido sano como una sustancia dañina. Esto se
denomina un trastorno auto inmunitario.
• Cada tipo de anticuerpo es único y defiende al
organismo de un tipo específico de antígeno.
 

Imágenes de anticuerpos:

Definición de anticuerpos monoclonales:
• Tipo de proteína producida en ellaboratorio que
se puede unir a sustancias del cuerpo, incluso a
las células cancerosas. Hay muchas clases de
anticuerpos monoclonales. Un anticuerpo
monoclonal se elabora para unirse a una sola
sustancia. Los anticuerpos monoclonales se usan
para tratar algunos tipos de cáncer. Se pueden
usar solos o para transportar medicamentos,
toxinas o materiales radiactivos directamente
hasta las célulascancerosas.

Imágenes de anticuerpos monoclonales:

de anticuerpos monoclonales:
• Obtención
El procedimiento para producir anticuerpos monoclonales demora,
habitualmente, cuatro meses .Para ello, se inyecta en ratones el
antígeno, aún cuando no esté puro. Luego de un período de espera que
permite un aumento de los linfocitos B específicos, se sacrifica el ratón y
se extrae el bazo, rico enlinfocitos. Como primera etapa, los linfocitos
que se obtengan del bazo, se mezclan con células mielomatosas
,agregando además polietilenglicol, un agente que facilita la fusión. Con
esto se consigue que algunas células mielomatosas se fusionen con
linfocitos del bazo, produciendo lo que se llama un hibridoma. Se logra
así una célula que combina la capacidad de producir anticuerpos de los
linfocitos, conla capacidad de multiplicarse indefinidamente de la célula
mielomatosa. No todas las células logran fusionarse , sino que por el
contrario, un escaso número de ellas. De allí que sea necesario eliminar
todas aquellas células que no se fusionen .

Los linfocitos que no se han fusionado se eliminan solos, porque luego
de unas pocas divisiones, mueren. El problema más complicado es
eliminar lascélulas del mieloma, que si continúan multiplicándose. Las
células mielomatosas que se utilizan para la fusión han sido
genéticamente alteradas, de modo que les falta una enzima vital para la
síntesis de DNA: la hipoxantina guanina fosforibosil trarferasa. Cuando
estas células mielomatosas mutadas se hacen crecer en un medie do
cultivo especial, ellas también mueren. Sin embargo, si se logran

• Luegodebe seleccionarse y purificarse, entre todos las hibridomas, aquel que
produce el anticuerpo específico que se desea. Muchas técnicas se han utilizado
para seleccionar los hibridomas específicos, siendo la más usada aquella que
utiliza un radioinmunoanálisis. Para ello, se fija el antígeno específico en el fondo
de pocillos de plástico. Luego, a cada uno de los pocillos se agrega el líquido delcultivo donde están creciendo las colonias de hibridomas. En aquellos casos en
que las colonias secretan el anticuerpo específico éste va a reaccionar con el
antígeno que se ha fijado al plástico, los demás se eliminan por un simple lavado.
En este momento se agrega un reactivo que reacciona solamente con la molécula
de anticuerpo monoclonal. Después de un tiempo de incubación apropiada,
nuevamentese lavan los pocillos. Para ubicar el hibridoma que interesa se busca
en qué pocillo está la radioactividad .
• La etapa final, es separar los distintos hibridomas resultantes, con el fin de
obtener una población proveniente de una sola célula. Para ello, las células se
diluyen hasta lograr que una célula quede en un micropocillo de cultivo. El
anticuerpo producido por esta célula y sus...