PRÁCTICA N 2

PRÁCTICA Nº2:
 
DETERMINACION DE PROTEINAS
METODO DE BIURET
 
Equipo N° 1:
Gómez Gutiérrez Gabriel
De la Luz Rodríguez Paulina
Vargas de la Mora Mario Alberto
Ramírez Gómez Tania Alejandrina
Almada  Ávila Gabriel
 
Materia: Energía y Consumo de Sustancias Fundamentales
 
 
Maestro: Jorge  Joel  Reyes Méndez
 
 
Trimestre: 3º
 
 
PRÁCTICA Nº2: DETERMINACION DE PROTENAS
OBJETIVOS:
Manejar en ellaboratorio el método de Biuret para determinar proteínas
Observar y determinar experimentalmente el efecto del pH sobre las proteínas de la leche
MATERIAL:
ü  1probeta de 50 ml
ü  2 gradillas
ü  2 pipetas de 10 ml
ü  3 pipetas de 5 ml
ü  1 pipeta de 1 ml
ü  12 tubos de 15x 100
ü  1 vaso de precipitado de 100ml
ü  12 tubos de 16 x 150
ü  1 balanza granataria
ü  Papel parafilm para 10 tubos
ü  1embudo y papel filtro
MATERIAL POR EQUIPO:
Franela
Jabón
Cloro
6gr. Aproximadamente de leche en polvo descremada
Masking-Tape, plumón de tinta indeleble.
 
REACTIVOS:
Agua destilada
Solución de ácido acético 0.1N
Solución de acetato de sodio  0.1N.
Solución de caseína (concentración 4mg / ml)
Reactivo de biuret 50 ml.
APARATOS POR EQUIPO:
1 centrifuga clínica
1 balanza granataria
2 espectrofotómetros4 celdas
INTRODUCCIÓN:
A)     CASEINA
La leche contiene vitaminas (principalmente tiamina, riboflavina, ácido pantoteico y vitaminas A, D y k), minerales (calcio, potasio, sodio, fosforo y metales en pequeñas cantidades), proteínas (incluyendo todos los aminoácidos esenciales), carbohidratos (lactosa) y lípidos. Los únicos elementos importantes de los que carece la leche son el hierro y lavitamina C.
Las proteínas se pueden clasificar de manera general en proteínas globulares y fibrosas. Las proteínas globulares son aquellas que tienden a agregarse en formas esferoidales y no establecen interacciones intermoleculares como son los puentes de hidrogeno (característico de las proteínas fibrosas) siendo solubilizadas en suspensiones coloidales
En al leche hay tres clases de proteínas:caseína, lactato albuminas y lactato globulinas (todas globulares).
La caseína es una proteína conjugada de la leche del tipo fosfoproteína que se separa de la leche por acidificación y forma una masa blanca. Las fosfoproteínas son un grupo de proteínas que están químicamente unidas a una sustancia que contiene acido fosfórico, en la caseína la mayoría de los grupos fosfato están unidos por los gruposhidroxilo de los aminoácidos serina y treonina. La caseína en la leche se encuentra en forma de sal cálcica (caseinato cálcico). La caseína representa cerca cerca del 77% al 82% de las proteínas presentes en la leche y el 2.7 % en composición de la leche liquida.
La caseína esta formada por α (s1), α (s2), β caseína y kappa- caseína formando una micela o unidad soluble. Ni la alfa ni la beta caseínason solubles en la leche, solas o combinadas. Si se añade la kappa caseína a las dos anteriores o a cada una de ellas por separado se forma un complejo de caseína que es solubilizado en forma de micela. Esta micela esta solubilizada por la kappa caseína mientras que las alfas y betas son fosfoproteínas que precipitan de iones calcio.O                                                                  O
‖‖                                                     ‖‖
Proteína – O –P –  O- + Ca2+                    proteína – O – P-  O – O-Ca2+
‖‖                                                           ‖‖
O ̠                                                    O ̠
Insolubles
La kappa caseína, sin embargo, tiene pocos grupos fosfato y un alto contenido d carbohidratos unidos a ella. También tiene todos sus residuos de serina y treonina con sus correspondientesgrupos hidroxilo, así como los carbohidratos dispuestos en una sola cara de su superficie por lo que esta parte exterior es fácilmente soluble en agua gracias a los grupos polares que posee. La otra parte de su superficie se une fácilmente al alfa y la beta caseína insoluble, lo que da lugar a la formación de la micela.

La...