Quimica Clinica

DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE ÁCIDO ÚRICO
PRINCIPIO DEL MÉTODO
El ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoina y peróxido de hidrógeno que en la presencia de la peroxidasa( POD), 4aminoferazona (4AF) y 2-4 Diclorofenol sulfonato ( DCPS) forma un compuesto rosáceo .
Ácido úrico+ 2H2O2 +O2 uricasa alantoína + CO2 +2H2O2,
2H2O2, + 4AF +DCPS O POD quinonaimina + 4H2O
MATERIAL* reactivos
R 1 Tampón | Fospatos pH 7.4 50mmol/L 2-4 diclorofenol sulfonato 4mmol/L |
R 2 enzimas | Uricasa 60U/L Peroxidasa660 U/L Ascorbato oxidasa 200 U/L 4 aminofenazona 1 mmol/L |
URID ACID CAL | Patrón primario acuoso 6mg/dL |
*Espectrofotómetro
* Cubetas de 1 cm
* Equipamiento habitual de laboratorio
MUESTRAS
* Suero o plasma heparinizado, orina diluida
PROCEDIMIENTO
* El espectrofotómetro debe estar a 520 nm
* Latemperatura del baño maría debe estar a 37°C
Ajuste el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada



Pipetear en una cubeta

| blanco | patrón | muestra |
RTml | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
Patron acido urico uL | -- | 25 | -- |
Muestra uL | -- | -- | 25 |

Mezclar e incubar 5 minutos a 37°C o 10 min a 25°C

Leer laabsorbancia del patrón y la muestra frente al blanco de reactivo, el color es estable 30 min como mínimo

Valores de referencia
Suero o plasma orina 24hrs
H 3.6-7.7 mg/dLM 2.5-6.8 mg/dL 250-750 mg/24H

Cálculos
absorb muestraabsor del patrón x 6(que es la concentración del patrón)
= mg/dL de ácido úricoFactor de conversión mg/dL x 59.5= umol/L

DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE PROTEÍNAS TOTALES
PRINCIPIO DEL MÉTODO
En medio alcalino, las proteínas dan un intenso color violeta azulado en...