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INFORME LABORATORIO Nº 9: Biología Molecular I, II y III

INTEGRANTES GRUPO: SECCION: B FECHA: 29 Noviembre 2013

Matías Hansen, Karla Rojas, Roberto Saldías y Moira Schneider

1. AnálisisDNA plasmidial purificado. Gel de agarosa al 0,8%
Fotografía gel: Cálculo de tamaño Molecular Plasmidio, pureza.
a) La distancia de migración del frente es 13,5cm

b) Cálculo de Rf de cada banda enel carril 1 (Estándar) para luego interpolar
Rf = Distancia migración de la banda
Distancia migración del frente

c) En el carril 2 (Plásmido sin digerir) podemos distinguir 4 bandasRf1 = 2,8 cm / 13,5 cm= 0,21
Rf2 = 3,1 cm / 13,5 cm = 0,23
Rf3 = 5,9 cm / 13,5 cm = 0,44
Rf4 = 7,1 cm / 13,5 cm = 0,53

d) Interpolando cada Rf del carril 2 (eje X) con el log Pb (eje Y),obteniendo así un logPb para cada Rf
Además podríamos calcular cada LogPb con la ecuación de la gráfica
(LogPb = -1,6671*Rf + 4,2734)
Rf1  Log Pb = 3,92  Pb = 103,92  Pb = 8.317
Rf2  Log Pb = 3,89 Pb = 103,89  Pb = 7.762
Rf3  Log Pb = 3,54  Pb = 103.54  Pb = 3.467
Rf4  Log Pb = 3,39  Pb = 103,39  Pb = 2.454

2. Digestión enzimas de restricción DNA plasmidial. Gel de agarosa al 0,8%Fotografía gel: Calculo de tamaño fragmentos DNA,
a) En el carril 3 (Plásmido digerido con Scal) podemos distinguir sólo una banda
b) Rf de la banda = 4,4cm / 13,5cm = 0,33
c) Interpolando Rf delcarril 3 (eje X) con el log Pb (eje Y), para obtener LogPb
Además podríamos calcular el LogPb con la ecuación de la gráfica
(LogPb = -1,6671*Rf + 4,2734)
d) Rf  Log Pb = 3,72  Pb = 103,72  Pb =5.248


3. Amplificación fragmento DNA. Gel agarosa al 1,5 %
Fotografía gel: Calculo de tamaño fragmentos DNA amplificado
a) La distancia de migración del frente es 14,1 cm
b) Cálculo de Rf decada banda en el carril 1 (Estándar) para luego interpolar
Rf = Distancia migración de la banda/ Distancia migración del frente
c) En el carril 2 (PCR con partidor forward y reverse del vector...