SDlab5

Laboratorio

5

Enzimas
Somsimith Deechaleune
BIOL3051

Objetivos
 Definir qué es una enzima y cómo ésta

actúa en las reacciones dentro de la
célula.

 Identificar los diferentes factores que

pueden afectar la actividad enzimática.

 Diferenciar

entre
inhibición
competitiva y no-competitiva.
 

 

Introducción
 Las enzimas son en su mayoría proteínas o

RNA (riboenzimas).

 Soncatalizadores químicos que agilizan una

reacción química que involucra la formación o
rompimiento de enlaces químicos.

 No

se consumen
reacciones.

ni

se

alteran

en

las

 Al finalizar la reacción la enzima se libera y

queda disponible para otra reacción.
 
 

Introducción
 Actúan sobre un sustrato formando un

complejo enzima-sustrato al unirse en
un lugar específico del sustrato: sitio
activode la enzima.
 Las

enzimas son selectivas, pocas
moléculas pueden interactuar con el sitio
activo y formar el complejo (figura 1).
 

 

Fig. 1: Reacción con participación de
una enzima.

Sustratos

Sitio activo

Complejo Enzima-Sustrato

 

Producto

Enzima

 

Fig. 2: Energía de activación necesaria
para iniciar la reacción.
               Sin enzima                                           Con enzima

Energía de
 activación

                  Curso de la reacción

 Cuando se forma esta interacción baja la energía de

activación necesaria para poder llevar a cabo la reacción.

 

 

Enzimas en una reacción
 Funcionan

mejor
bajo
condiciones
específicas
(óptimas) que incluyen:




Temperatura
pH

 Los cambios pueden alterar

el desempeño de la enzima,
desactivarla o destruirla.
 Algunas enzimas necesitanactivadores
para
poder
formar el complejo enzimasustrato.

 

 

Cofactores e Inhibidores
Activadores que cambian la conformación de
la enzima para formar el complejo enzimasustrato reciben el nombre de cofactores:




pueden ser
orgánico).
de
origen
coenzimas.

 

iones

metálicos

orgánico

se

 

(nada
llaman

Cofactores e Inhibidores
Los inhibidores impiden la actividad de la
enzima, como el pH yla ºT. Pueden afectar el
sitio activo de de dos maneras:


Competitiva: Bloquea el sitio activo (Fig.
3).



No competitiva: Altera indirectamente
la forma del sitio activo, al pegarse en
otro lugar de la enzima (Fig. 4).
 

 

Fig. 3: Inhibición competitiva

 

 

Fig. 4: Inhibición no competitiva

 

 

Ejemplos de enzimas: Catalasa
 Se encuentra en casi todas las células

aeróbicas.

Actúa rompiendo el peróxido de hidrógeno en

agua y oxígeno que se produce en las células:
catalasa

2 H2O2

2 H2O + O2

 Observaremos su funcionamiento en varios

organismos.
 

 

Ejercicio 1: Funcionamiento de la catalasa
en varios organismos.
 Materiales










Peróxido de hidrógeno
Papa
Hígado
Setas
Espinaca
Gasa (cheesecloth)
Placas de porcelana
Goteros
Morteros o licuadora
 

 Procedimiento
 En este ejercicio se prepararán varios homogenados para

obtener partículas pequeñas y uniformes al mezclarlas con el
agua.
 Para preparar los homogenados, corte en pedazos por separado
las muestras de papa, hígado, setas y espinaca.
 Usando una licuadora o mortero, muela el material con un poco
de agua hasta diluir parte de la muestra; no muela
excesivamente para que quedenpedazos pequeños del
material.
 De ser necesario, filtre el macerado con una gasa (cheesecloth).
 Coloque cada homogenado en un tubo de ensayo.
 Usando un gotero, coloque cinco gotas de cada homogenado en

las fosas de la placa de porcelana y añada tres gotas de
peróxido de hidrógeno.

 

 

Resultados
Resultados homogenado con peróxido de
hidrógeno
Homogenado

Reacción al añadir gotas deperóxido.

Agua
Papas
Setas
Hígado
Espinaca

 

 

Preguntas
1. ¿Qué ocurrió al añadir el peróxido?
 
2. ¿Ocurrió lo mismo para todas las
muestras?
3. ¿Por qué se forman las burbujas?
4. ¿Qué otros organismos podrían
usarse para esta prueba?
 

 

Ejercicio 2: ¿Se comportan todos los
organismos de la misma manera?
 Materiales
Homogenado de hígado, papa,...