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“Estrés Oxidativo en Organismos Marinos”






Técnicas de Medición de diferentes indicadores de estrés oxidativo


























INTRODUCCIÓN

El presente trabajo busca mostrar de manera sencilla y resumida algunas de las técnicas utilizadas para evaluar de manera integral las diferentes variables que juegan un papel importante en laconstrucción del panorama del estado de “estrés oxidativo” en diferentes organismos marinos y terrestres.

Es importante mencionar que cada una de las variables consideradas para medir ésta respuesta fisiológica juegan un papel importante y único, que nos permite conocer los mecanismos que se activan en el metabolismo de un individuo para responder ante una determinada situación; esto nos acerca auna interpretación más certera del modo de vida de las diferentes especies de estudio, su importancia en el ecosistema y las adaptaciones que presentan ante distintos factores medioambientales.

Además, el uso de éstas herramientas nos brindan una variedad de usos prácticos en eventos cotidianos que nos ayudan al mejoramiento de nuestro desarrollo en términos médicos, tecnológicos y de mejoraprovechamiento de nuestros recursos.

El estrés oxidativo no es un estado estático o tajante en su entendimiento, es decir, es un proceso muy amplio, cambiante, dependiente de una amplia gama de situaciones y/o variables, y que incluso fluctúa entre organismos de la misma especie.

Debido a lo anterior es que es importante buscar la manera más adecuada de medir diversos parámetrosfisiológicos, conociendo ventajas y desventajas de las técnicas usadas y sus alcances, para así, obtener respuestas óptimas para la correcta interpretación de la información que nos brindan.


































RADICAL SUPERÓXIDO

Historia
El O2•- se produce principalmente en la cadena transportadora de electrones debido a que una parte de los electrones quepasa por ella es captada por el O2. Lo anterior ocurre principalmente en la Ubiquinona o Coenzima Q ya que tanto la Ubisemiquinona como el Ubiquinol pueden ceder fácilmente un electrón al O2.

Aproximadamente el 0.1% del O2 consumido en la respiración forma O2•-, algunas enzimas que durante su función generan el radical son la NADPH oxidasa, la Xantina oxidasa, la lipooxigenasa y algunasperoxidasas inespecíficas. Además en el humano el 3% de su hemoglobina se oxida al día originando O2•- y metahemoglobina (Konigsberg, 1998).

Uno de los trabajos que sentó bases sobre el estudio y la relevancia biológica del O2•- fue el de McCord y Fridovich en 1968 al demostrar que la enzima Xantina oxidasa produjo O2•- y que los eritrocitos poseen una enzima que de manera eficiente y específicacataliza la conversión de del O2•- a H2O2 + O2. Gracias a lo anterior se estableció que el O2•- se obtiene de forma común en los sistemas biológicos aerobios y que la SOD brinda un mecanismo de defensa importante en contra del radical (Fridovich, 1995).

Principio de la determinación de producción de radical superóxido
Por medio de un método fotocolorimétrico indirecto y discontinuo se mide laproducción endógena de O2•- a través de la cuantificación de la reducción de ferricitocromo C por el O2•- durante un intervalo de tiempo fijo a una longitud de onda de 550 nm (Drossos et al., 1995).

Citocromo c (Fe III) + O2 .- O2 + Citocromo c (Fe2+)

Modificaciones
Realizar un control de la reacción con SOD para confirmar que la reducción de la Citocromoc es dependiente del radical superóxido (Taniguchi y Gutteridge, 2000).

Ventajas y desventajas
La técnica se aplica a enzimas, células enteras y a tejidos vasculares (Banerjee, 2008).
El Citocromo c también se puede reducir por efecto de muchas otras sustancias entre las que se encuentran el glutatión y el ascorbato por lo que es necesario verificar que la producción del color se inhiba...