ACTIVIDAD DE LA AMILASA SALIVAL

ACTIVIDAD DE LA AMILASA SALIVAL
1. OBJETIVOS
GENERAL
Analizar la actividad enzimática de la amilasa sobre un tipo de sustrato.
ESPECÍFICOS
2. RESUMEN
3. CÁLCULOS Y RESULTADOS
A continuación se presentan los resultados obtenidos en laboratorio para la práctica denominada “Actividad de la amilasa salival”
Tabla 1. Labilidad térmica de las enzimas
Tubo de ensayo
Enzima
Condiciones del experimentoSustrato
Incubación
Coloración con yodo
1
Amilasa
Enz. Calentada Prev
Almidón
10 min, 37ºC
Azul-Morado
2
Amilasa
Enzima nativa
Almidón
10 min, 37ºC
Transparente
3
Amilasa
Enzima nativa
Almidón
10 min, 37ºC
Azul oscuro

Tabla 2. Influencia del pH sobre la actividad de las enzimas
Tubo de ensayo
Enzima
pH del medio
SustratoIncubación
Coloración con yodo
1
Amilasa
4.0
Almidón
10 min, 37ºC
Azul oscuro
2
Amilasa
6.8
Almidón
10 min, 37ºC
Transparente
3
Amilasa
11.0
Almidón
10 min, 37ºC
Transparente

Tabla 3. Especificidad de las enzimas
Tubo de ensayo
Sustrato
Enzima
Incubación
Coloración con yodo
Reacción de Fehling
1
Almidón
Amilasa
10 min, 37ºC
Transparente
-
2
Almidón
Sacarosa
10 min, 37ºC
Azul oscuro
-
3
SacarosaAmilasa
10 min, 37ºC
-
Azul claro
4
Sacarosa
Sacarosa
10 min, 37ºC
-
Naranja

Tabla 4. Influencia de los activadores e inhibidores
Tubo de ensayo
Sustrato
Enzima
Incubación
Coloración con yodo (Lugol)
1 (NaCl)
Almidón
Amilasa
10 min, 37ºC
Transparente
2 (CuSO4)
Almidón
Amilasa
10 min, 37ºC
Azul oscuro

4. DISCUSIÓN
4.1 Labilidad Térmica de las enzimas

La velocidad de las reacciones enzimáticasaumenta, por lo general, con la temperatura, dentro del intervalo en que la enzima es estable y activa. La velocidad por lo general se duplica por cada 10°C de aumento térmico.

Se observó una coloración azul-morado para el tubo Nº1, esto nos muestra que no existió actividad dentro de dicho tubo debido a las altas condiciones de temperatura a las que se llevó durante 2 minutos antes de ponerlo en bañomaría a 37ºC, en conclusión, la enzima se desnaturalizó, para comprobar dicha afirmación es preciso mencionar lo que nos dice la teoría: la actividad enzimática máxima se alcanza a una temperatura óptima, luego la actividad decrece y finalmente cesa por completo a causa de la desnaturalización progresiva de la enzima por acción de la temperatura, esto nos ayuda a entender un poco mejor la razónpara que la prueba diese negativa, es decir, que no se presentara actividad.

Para el tubo Nº2 la coloración obtenida fue transparente, esto indica que si se presentó actividad dentro del tubo. Este es el resultado de realizar la prueba con la enzima a condiciones normales, el sometimiento a baño maría con un temperatura de 37ºC que se realizó al final no afecta las condiciones normales yamencionadas,esto puede comprobarse si revisamos la teoría: Una enzima humana típica posee su óptimo a 37 º C, en cambio otros organismos como, por ejemplo, las bacterias termófilas resistentes a altas temperaturas tienen su óptimo de actividad cercano a los 80º C.

Por último, para el tubo Nº3 se presentó una coloración azul oscura, al igual que en el tubo Nº1 no se presentó actividad, esta vez se debió ala baja temperatura a la cual fue llevada la enzima (0ºC), la teoría nos dice que muchas enzimas se pueden conservar metiéndolas a 0ºC o temperaturas más bajas, logrando recuperar su actividad después de descongelarse.

4.2 Influencia del pH sobre la actividad de las enzimas
La mayoría de las enzimas poseen un pH característico al cual su actividad es máxima, al cual se le denomina pH óptimo de laenzima, así que, por encima o por debajo de este pH su actividad disminuye. Cada enzima tiene un pH óptimo de acción, que no siempre es cercano a la neutralidad, aunque este es el caso más frecuente
La amilasa se produce principalmente en las glándulas salivales (sobre todo en las glándulas parótidas) y en el páncreas. Tiene actividad enzimática a un pH de 7.

Según lo anterior se puede...