ADN cebolla
Páginas: 6 (1337 palabras)
Publicado: 24 de octubre de 2015
Universidad Autónoma de Chiriquí
Facultad de Ciencias Naturales y Exactas Escuela de Química
Informe de Bioquímica II
Experimento N°2
Extracción de ADN de Tejido Vegetal
Presentado por:
Sherlynn Petit 4-765-2209
Margarita Trejos 4-758-1914
Prof. Albertina Montenegro
Fecha de entrega: 31/08/2015
Extracción de ADN de Tejido Vegetal
Objetivos
Extraer el ADN de la cebolla.
Compararla extracción de ADN de tejido vegetal con la extracción de ADN de tejido animal.
Identificar el grado de pureza del ADN mediante espectroscopia UV
Resumen
El ADN es el componente principal de todas las células y es el encargado de transmitir la información genética. Se encuentra almacenado tanto en tejidos animales como en vegetales. En el caso de esta experiencia nos centraremos en laextracción de este componente de la cebolla. Para llevar a cabo dicha tarea homogenizamos el tejido con ayuda de la licuadora, con ayuda del EDTA un agente quelante capturamos los iones Mg+2 necesarios para la funcionalidad de las ADNasas, con el SDS desnaturalizamos las proteínas.
Posteriormente el ADN fue aislado del agua por acción del etanol frío, el cual provocó la precipitación de las hebras.Finalmente podemos decir que la extracción de ADN vegetal es un proceso complejo, ya que, debe romperse la pared celular para liberar las células que lo contienen.
Marco Teórico
La mayoría de las células contienen ADN en el núcleo sin embargo en las células vegetales este se encuentra presente en el núcleo, mitocondria y cloroplastos (Bohinski, 2011).
Para llevar a cabo la extracción del ADN de lacebolla, es necesario llevar a cabo los siguientes pasos:
Ruptura de tejidos y paredes celulares.
Ruptura de las membranas.
Inhibición de las enzimas que destruyen el ADN.
Extracción de contaminantes.(Angulo,2010)
Cada uno de estos pasos garantiza la obtención de un ADN de buena calidad.
Materiales
Licuadora (marca Oster), Papel filtro, Goteros, tubos de centrifuga, probetas de 10
25mL, 100mL(marca Kimax), policial, gradilla.
Solución de EDTA pH 7, amortiguador salino, SDS 20%,Citrato de Sodio, etanol al 80%.
Reactivos
Nombre
mbre
Descripción
Toxicidad
EDTA pH 7
Fórmula: C10H16N2O8
Masa molar: 292,24 g/mol
Densidad: 860,00 kg/m³ Denominación de la IUPAC: 2,2',2'',2'''- (Ethane-1,2- diyldinitrilo)tetraacetic
acid
Punto de fusión: 237 °C
Soluble en: Agua
Ingestión:Puede causar irritación en el tracto digestivo puede causar reacción alérgica. Inhalación Puede causar Irritación :en las
vías tracto respiratorias
Ojos: ardor
Cloruro de Sodio
Fórmula: NaCl
Masa molar: 58,44 g/mol Densidad: 2,16 g/cm³ Punto de fusión: 801 °C Punto de ebullición: 1.413 °C
Ingestión: mareos y nauseas.
Ojos: enrojecimiento.
Piel: Ardor
SDS
Fórmula:NaC12H25SO4
Masa molar: 288,372 g/mol
Densidad: 1,01 g/cm³ Punto de fusión: 206 °C Denominación de la IUPAC: Sodium lauryl sulfate
Ingestión: mareos, daño
al tracto digestivo Inhalación: ardor nasal Ojos: picazón
Piel: irritación
Etanol
Densidad: 789,00 kg/m³
Punto de ebullición: 78,37 °C
Masa
molar: 46,06844 g/mol
Punto de fusión: -114 °C Presión de vapor:5,95 kPa
Ingestión: Daños intestinales
Inhalación: irritación de mucosas
Procedimiento
Preparación de Reactivos
Preparamos EDTA pH 7 y Cloruro de Sodio al 0,5% pesamos
7,5g y lo disolvimos en 100mL de agua. Amortiguador salino.
Extracción del ADN de la cebolla
1. Mezclamos 50g de Cebolla y 150mL de amortiguador (EDTA pH 7), licuamos.
2. Adicionamos15mL de SDS y calentamos a60°C durante 10 minutos.
3. Enfriamos y centrifugamos a 3000rpm por 15 minutos.
4. Decantamos y la fase acuosa la colocamos en baño de hielo y le adicionamos el doble de su volumen en etanol por las paredes.
5. Lavamos el ADN en etanol al 70%
6. Guardamos el ADN en amortiguador salino y congelamos para su posterior utilización.
Resultados
Figura 1. ADN extraído de la cebolla
Cuadro...
Universidad Autónoma de Chiriquí
Facultad de Ciencias Naturales y Exactas Escuela de Química
Informe de Bioquímica II
Experimento N°2
Extracción de ADN de Tejido Vegetal
Presentado por:
Sherlynn Petit 4-765-2209
Margarita Trejos 4-758-1914
Prof. Albertina Montenegro
Fecha de entrega: 31/08/2015
Extracción de ADN de Tejido Vegetal
Objetivos
Extraer el ADN de la cebolla.
Compararla extracción de ADN de tejido vegetal con la extracción de ADN de tejido animal.
Identificar el grado de pureza del ADN mediante espectroscopia UV
Resumen
El ADN es el componente principal de todas las células y es el encargado de transmitir la información genética. Se encuentra almacenado tanto en tejidos animales como en vegetales. En el caso de esta experiencia nos centraremos en laextracción de este componente de la cebolla. Para llevar a cabo dicha tarea homogenizamos el tejido con ayuda de la licuadora, con ayuda del EDTA un agente quelante capturamos los iones Mg+2 necesarios para la funcionalidad de las ADNasas, con el SDS desnaturalizamos las proteínas.
Posteriormente el ADN fue aislado del agua por acción del etanol frío, el cual provocó la precipitación de las hebras.Finalmente podemos decir que la extracción de ADN vegetal es un proceso complejo, ya que, debe romperse la pared celular para liberar las células que lo contienen.
Marco Teórico
La mayoría de las células contienen ADN en el núcleo sin embargo en las células vegetales este se encuentra presente en el núcleo, mitocondria y cloroplastos (Bohinski, 2011).
Para llevar a cabo la extracción del ADN de lacebolla, es necesario llevar a cabo los siguientes pasos:
Ruptura de tejidos y paredes celulares.
Ruptura de las membranas.
Inhibición de las enzimas que destruyen el ADN.
Extracción de contaminantes.(Angulo,2010)
Cada uno de estos pasos garantiza la obtención de un ADN de buena calidad.
Materiales
Licuadora (marca Oster), Papel filtro, Goteros, tubos de centrifuga, probetas de 10
25mL, 100mL(marca Kimax), policial, gradilla.
Solución de EDTA pH 7, amortiguador salino, SDS 20%,Citrato de Sodio, etanol al 80%.
Reactivos
Nombre
mbre
Descripción
Toxicidad
EDTA pH 7
Fórmula: C10H16N2O8
Masa molar: 292,24 g/mol
Densidad: 860,00 kg/m³ Denominación de la IUPAC: 2,2',2'',2'''- (Ethane-1,2- diyldinitrilo)tetraacetic
acid
Punto de fusión: 237 °C
Soluble en: Agua
Ingestión:Puede causar irritación en el tracto digestivo puede causar reacción alérgica. Inhalación Puede causar Irritación :en las
vías tracto respiratorias
Ojos: ardor
Cloruro de Sodio
Fórmula: NaCl
Masa molar: 58,44 g/mol Densidad: 2,16 g/cm³ Punto de fusión: 801 °C Punto de ebullición: 1.413 °C
Ingestión: mareos y nauseas.
Ojos: enrojecimiento.
Piel: Ardor
SDS
Fórmula:NaC12H25SO4
Masa molar: 288,372 g/mol
Densidad: 1,01 g/cm³ Punto de fusión: 206 °C Denominación de la IUPAC: Sodium lauryl sulfate
Ingestión: mareos, daño
al tracto digestivo Inhalación: ardor nasal Ojos: picazón
Piel: irritación
Etanol
Densidad: 789,00 kg/m³
Punto de ebullición: 78,37 °C
Masa
molar: 46,06844 g/mol
Punto de fusión: -114 °C Presión de vapor:5,95 kPa
Ingestión: Daños intestinales
Inhalación: irritación de mucosas
Procedimiento
Preparación de Reactivos
Preparamos EDTA pH 7 y Cloruro de Sodio al 0,5% pesamos
7,5g y lo disolvimos en 100mL de agua. Amortiguador salino.
Extracción del ADN de la cebolla
1. Mezclamos 50g de Cebolla y 150mL de amortiguador (EDTA pH 7), licuamos.
2. Adicionamos15mL de SDS y calentamos a60°C durante 10 minutos.
3. Enfriamos y centrifugamos a 3000rpm por 15 minutos.
4. Decantamos y la fase acuosa la colocamos en baño de hielo y le adicionamos el doble de su volumen en etanol por las paredes.
5. Lavamos el ADN en etanol al 70%
6. Guardamos el ADN en amortiguador salino y congelamos para su posterior utilización.
Resultados
Figura 1. ADN extraído de la cebolla
Cuadro...
Leer documento completo
Regístrate para leer el documento completo.