Adn en el ser humano
Lo primeroque se tiene que hacer es extraer el ADN, ya sea de sangre, folículos capilares, etc.
Generalmente se extrae sangre y se utiliza un método muy sencillo y económico como es el método delperclorato. Primero se extraen 5 ml de sangre periférica en tubos con E.D.T.A. y se colocan 3ml de sangre en tubos de centrífuga de polipropileno estériles, con capacidad de 15 ml y fondo cónico, y se leadicionan 11 ml de la solución amortiguadora de lisis I a 4 ºC (sacarosa 0.3 M, Tris-HCl. 0.010 M, MgCl2 0.005 M 6H2O, tritón X-100 pH 7.5). Se mezcla por inversión cuidadosamente y se procede acentrifugar a 4,500 rpm a 4º C durante 10 minutos. Posteriormente se decanta cuidadosa y rápidamente el sobrenadante a otro tubo, sin levantar el botón formado que es el necesario para la extracción del ADN.Después se resuspende el botón obtenido con 2.25 ml de solución amortiguadora de lisis II (NaCl 0.075 M, EDTA 0.024 M), 62.5ul de SDS al 10 % y 550ul de perclorato de sodio 5M. Se agita durante 10minutos a temperatura ambiente con agitación mecánica. Después se le adiciona a cada tubo 1 ml de NaCl 6 M y se agita muy fuerte con la mano durante 15 segundos y se centrifuga a 3,500 rpm por 30minutos a 4º C. Después se Recupera el sobrenadante en otro tubo de centrífuga de 15 ml estéril, y se adiciona 3.5 ml de isopropanol absoluto a 4ºC, se tapa los tubos y se mezcla suavemente en posición...
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