aislamiento y analisis de ADN genomico

Aislamiento y análisis de ADN genómico
Introducción:
Partiendo de la identificación del ADN como material genético es que nos podemos introducir en el amplio mundo de la biología molecular. Estamacromolécula compuesta por una serie de desoxirribonucleótidos contiene la información genética que se transmite y expresa en un organismo. Por otra parte, su estudio permite profundizar en distintoscampos que incluyen la comprensión de los genomas junto al entendimiento de una característica esencial de todos los seres vivos, la reproducción.
Así, dentro de las muchas metodologías utilizadaspara la extracción y visualización del ADN, encontramos dos procesos muy sencillos y óptimos que dan paso a su estudio; Salting Out y electroforesis en gel de agarosa, respectivamente. Ahora, alreconocer cuál es la importancia de esta biomolécula, podremos a través de estas técnicas aislar ADN genómico (Del núcleo) con una muestra de sangre para darle un análisis y comprenderlo detalladamente.Resultados
Extracción del ADN: Salting Out.
Tras la primera centrifugación a 3000 rpm, se evidencia una capa (Buffy coat) que contiene leucocitos.
Después de la agregación de buffer de lisis I, juntoa la segunda centrifugación, se genera un botón celular en el fondo del vial y un sobrenadante.
Posteriormente, al haber usado la solución buffer de lisis II, SDS, perclorato de sodio, cloruro desodio e isopropanol, teniendo en cuenta las debidas mezclas, separaciones y la centrifugación en su adecuado momento, se percibe una pequeña y blanca malla de ADN.
Se generan, en dos momentosdistintos, sobrenadantes que incluyen proteínas, membranas y glóbulos rojos lisados.
Electroforesis en gel de agarosa.



Figura 1: Electroforesis al 1% en gel de agarosa.
Se muestra la distanciadesplazada por los fragmentos de ADN en 7 celdas distintas, a un volumen de 5 ul con buffer de carga. Se observa un desplazamiento muy similar y cercano en las distintas bandas.


Discusión de...