Aislamineto De DNA Plasmidico
Páginas: 3 (696 palabras)
Publicado: 7 de noviembre de 2015
INTRODUCCIÓN
Los plásmidos son moléculas pequeñas de DNA circular (entre dos y varios cientos de kilobases) que se replican de forma autónoma e independiente del cromosoma de la célula. Son muycomunes en bacterias y algunos de ellos, los más pequeños, existen en las células bacterianas en un número elevado (hasta 100 copias por células). Los plásmidos son una herramienta fundamental enBiología Molecular e Ingeniería Genética ya que se pueden usar como "vectores" para introducir en ellos cualquier fragmento de DNA de interés y, de esta forma, amplificarlo de forma natural dentro de labacteria en la que el plásmido se replica.
Se han desarrollado un gran número de métodos para la purificación de DNA plasmídico de bacterias y todos ellos implican invariablemente tres pasos:
1.Crecimiento de la estirpe bacteriana portadora en medio de cultivo
2. Recogida y lisis de las bacterias
3. Purificación del DNA plasmídico
El método utilizado para la obtención de plásmido en estapráctica se denomina lisis alcalina y se basa en la desnaturalización selectiva del DNA cromosómico.
OBJETIVOS
Aislar DNA plasmídico bacteriano, comprobando dicho aislamiento mediante electroforesis en gelde agarosa.
RESULTADOS
ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS
El método utilizado para el aislamiento del plásmido PUC-19 que se encontraba en una bacteria (Escherichia coli) fue por lisisalcalina.
Este método explota las diferencias en las propiedades de desnaturalización y renaturalización entre el DNA plasmídico (pequeños círculos de DNA cerrados covalentemente) y el DNA cromosómico(fragmentado).
Contábamos con una solución de 1 x 107 bacterias a la cual se agregaron 100 µL de la solución I (Solución GTE), al contener una alta concentración de sales que regulan el pH de lasolución que aproximadamente se encontraba en 7.8, la presencia de glucosa impide que la membrana celular se rompa bruscamente por mantener la presión osmótica de la célula y EDTA (ácido etilendiamino...
INTRODUCCIÓN
Los plásmidos son moléculas pequeñas de DNA circular (entre dos y varios cientos de kilobases) que se replican de forma autónoma e independiente del cromosoma de la célula. Son muycomunes en bacterias y algunos de ellos, los más pequeños, existen en las células bacterianas en un número elevado (hasta 100 copias por células). Los plásmidos son una herramienta fundamental enBiología Molecular e Ingeniería Genética ya que se pueden usar como "vectores" para introducir en ellos cualquier fragmento de DNA de interés y, de esta forma, amplificarlo de forma natural dentro de labacteria en la que el plásmido se replica.
Se han desarrollado un gran número de métodos para la purificación de DNA plasmídico de bacterias y todos ellos implican invariablemente tres pasos:
1.Crecimiento de la estirpe bacteriana portadora en medio de cultivo
2. Recogida y lisis de las bacterias
3. Purificación del DNA plasmídico
El método utilizado para la obtención de plásmido en estapráctica se denomina lisis alcalina y se basa en la desnaturalización selectiva del DNA cromosómico.
OBJETIVOS
Aislar DNA plasmídico bacteriano, comprobando dicho aislamiento mediante electroforesis en gelde agarosa.
RESULTADOS
ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS
El método utilizado para el aislamiento del plásmido PUC-19 que se encontraba en una bacteria (Escherichia coli) fue por lisisalcalina.
Este método explota las diferencias en las propiedades de desnaturalización y renaturalización entre el DNA plasmídico (pequeños círculos de DNA cerrados covalentemente) y el DNA cromosómico(fragmentado).
Contábamos con una solución de 1 x 107 bacterias a la cual se agregaron 100 µL de la solución I (Solución GTE), al contener una alta concentración de sales que regulan el pH de lasolución que aproximadamente se encontraba en 7.8, la presencia de glucosa impide que la membrana celular se rompa bruscamente por mantener la presión osmótica de la célula y EDTA (ácido etilendiamino...
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