Aizlamiento de rhizobium

AIZLAMIENTO DE RHIZOBIUM
MEDIO DE CULTIVO LM
* Manitol
* K2HPO4
* MgSO4 * 7H20
* NaCl
* Extracto de levadura
MATERIALES Y SUSTANCIAS:
1. MATRAZ
2. ALGODÓN,PAPELALUMINO,GASA,LIGAS
3. ASA DE TRANSFERENCIA
4. AUTOCLAVE
5. PEACHIMETRO

PROCEDIMIENTO:
1. Se coloca en el matraz 100ml de LM.
2. Luego con el peachimetro medir el LM. (pH 6,4-6,6).3. Se pone a esterilizar el Matraz con LM junto con el magneto en el autoclave a una temperatura de 121oC, aproximadamente por una hora.
4. Una vez esterilizado el Matraz, dejar enfriar.
5.Tomar la muestra de cultivo puro de rhizobium con un asa de transferencia y colocarla a un costado de la parte interna del matraz. Taponar
6. Colocarlo en el calentador agitador por unos 10 díasmáximo.
7. El LM SE tornara de color cremoso por la presencia de rihizobium y de color amarillo por la presencia d contaminantes.
8. Una vez listo se lo pone a refrigerar hasta su utilización.GRAFICOS:
PREPARACIÒN DEL MEDIO DE CULTIVO LM




Rhizobium
PLANTAS:
* Estolón de Maní Forrajero
* Semillas de centrosema, pueraria y gandul.
MATERIALES:
* 200 vasosdesechables
* Tierra Fértil
* Regadera, carretilla, pala, guantes, mascarillas.
* Invernadero
SUSTANCIAS:
* Captan e hidrocomplex
PROCEDIMIENTOS:
1. Tomar la tierra fértil y llevarlaal invernadero.
2. Agujerar la parte inferior de los vasos desechables.
3. Una vez agujerados los vasos llenarlos con la tierra previamente desinfectada con Captan e hidrocomplex, llenarhasta el tope del vaso.
4. Tomar las semillas ya previamente curadas y sembrar en cada vaso
* 80 vasos con frejol Gandul(2 semillas)
* 40 vasos con maní Forrajero( 1 estolón)
* 40 vasoscon Centrosoma(3 semillas)
* 40 vasos con Pueraria( 5 semillas)
5. Regar las semillas al menos cada dos días.
6. Después de dos semanas o cuando la semilla haya germinado tomar 15 vasos...