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Facultad de Ciencia

DBIO1012

INFORME TRABAJO PRÁCTICO N° 4
RECONOCIMIENTO DE BIOMOLECULAS.


Sección: B35
Alumnos: Camila Araya Rioseco – Paulina Inostroza Jiménez – Linda Leiva Retamal.
Profesora: Monserrat Araya.
Fecha de entrega: 28. 04. 2014
Introducción
El siguiente informe tratará sobre la detección polisacáridos mediante la solución de Lugo; la detecciónde proteínas mediante método de Biuret y, por último, la extracción del ADN de un vegetal. La solución de Lugo es una solución de Yodo y Yoduro de Potasio, que sirve para identificar polisacáridos. Cuando se agrega una sustancia que lleva almidón a una solución de Yodo (Lugol), ésta tiñe de un color violeta intenso, esto es debido a que los átomos de Yodo se introducen en la amilasa, dándoles esacoloración. El color desaparece al calentar la disolución volviéndose transparente porque los átomos de Yodo se salen de la amilasa. Al enfriar la disolución retorna al calor violeta (Educ. quím., 2012).
El método de Biuret se basa en la formación de un complejo coloreado entre el Cu2+ y los grupos NH de los enlaces peptídicos en medio básico. 1Cu2+ se acompleja con 4 NH. La intensidad decoloración es directamente proporcional a la cantidad de proteínas (enlaces peptídicos) y la reacción es bastante específica, de manera que pocas sustancias interfieren. La sensibilidad del método es muy baja y sólo se recomienda para la cuantificación de proteínas en preparados muy concentrados(Campbell et al, 2006).

Y por último, el ADN (ácido desoxirribonucleico) es la sustancia química donde sealmacenan las instrucciones que dirigen el desarrollo de un huevo hasta formar un organismo adulto, que mantienen su funcionamiento y que permite la herencia. Los organismos vivos formados por células que tienen núcleos verdaderos, es decir, separados del citoplasma por una membrana doble bien diferenciada, se denominan eucariotas. Estos organismos tienen bien definido su núcleo del resto de lacélula. El ADN está organizado en estructuras llamadas cromosomas. Los organismos eucariotas como los animales, plantas y hongos almacenan la mayor parte de su ADN dentro del núcleo. El ADN es una molécula de longitud gigantesca, que está formada por agregación de tres tipos de sustancias: azucares, llamados Desoxirribosas, el ácido fosfórico, y bases nitrogenadas de cuatro tipos: adenina, guanina,timina y citosina (Curtis, 1983).
Los objetivos a cumplir son los siguientes: identificar diferentes hidratos de carbono, el por qué cambio el color de la sustancia, por qué no cambió el color y cuál es la reacción que ocurre; identificar proteínas mediante el reactivo de Biuret, cuál es la función de NaOH y cuál es la reacción química que permite el experimento y por último, identificar el ADNpresente en una célula, cuál es la razón para formar la papilla, cuál es la función del detergente y, por qué se usa el alcohol etílico.



Materiales
Jugo de papa
Jugo de cebolla
Agua
Solución de almidón
Solución de glucosa
Yodo (Lugol)
Yoduro de potasio (KI)
Albúmina de huevo
Hidróxido de sodio (NaOH)
Sulfato de cobre (CuSO4)
Plátano
Trozo de tela para filtrar
1 Pipeta de PasteurAlcohol de 96°
1 varilla de vidrio
1 embudo
Lava lozas (líquido)
Vaso precipitado
7 tubos de ensayo
1 probeta
Gradilla
Métodos
Actividad N°1 → Detección de polisacáridos (mediante la solución de Lugol).
En esta actividad se realizarán 5 test, se trabajará con tubos de ensayo, cada uno tendrá jugo de papa, jugo de cebolla, agua, solución de almidón y solución de glucosa. Al que se leagregará con un gotario 10 gotas de Yodo (Lugol), luego cada muestra se agitará bien y se dejará reposar para posteriormente observar la muestra y ver si reaccionó (color azul violáceo= positivo ó café amarillo=negativo).
Este test de yodo se usará para distinguir el almidón de los monosacáridos, disacáridos y otros polisacáridos.

Actividad N°2 → Detección de proteínas (mediante método de...